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如何正確操作使用355618BECKMAN超速離心管?

閱讀:114發(fā)布時(shí)間:2023-5-2

  355618BECKMAN超速離心管的滅菌是用10%的過(guò)氧化氫浸泡,福爾馬林也適合所有的離心管但不全。70%的乙醇適用于PA和PP和PET管,水沸滅菌適合PA和PP管。環(huán)氧乙烷適合PC管。高溫高壓滅菌法,115℃、30min適合PA、PP和PC材料的離心管,但是PC材料的使用壽命將受限制;121℃、20min適合PA和PP管,126℃、15min均不適合任何離心管。此外,離心管在紫外下無(wú)法滅菌。
 
  355618BECKMAN超速離心管操作中需要注意如下問(wèn)題:
 
  (1)建議使用幼嫩的材料,材料含水量大時(shí),可用70%乙醇擦拭,蒸餾水稍沖洗后用濾紙吸干,于液氮中研磨。如果材料量大(20g以上),或所用的植物材料較老,或材料含有較多的酚類(lèi)物質(zhì),應(yīng)提高β-巰基乙醇的用量。
 
  (2)氯仿抽提時(shí),要保證抽提液中有一定的鹽濃度,否則DNA進(jìn)入沉淀。
 
  (3)CTAB溶液在15℃以下會(huì)沉淀,因此離心和其他操作時(shí)不可在低溫下進(jìn)行。
 
  (4)加入沉淀緩沖液應(yīng)在高于15℃的室溫下沉淀,如果室溫適宜,沉淀時(shí)間足夠而無(wú)沉淀出現(xiàn),可能是鹽濃度高,這時(shí)可再加入沉淀緩沖液降低鹽濃度。離心收集CTAB沉淀緩沖液沉淀的DNA時(shí),不能離心過(guò)度,高速度及長(zhǎng)時(shí)間的離心都會(huì)使沉淀過(guò)緊,而再溶解困難。
 
  (5)采用真空抽干沉淀時(shí),不能抽得太干抽得太干會(huì)使DNA斷裂,也可不采用真空抽干,將離心管置通風(fēng)柜或超凈工作臺(tái)中令乙醇自然蒸干,這樣對(duì)DNA造成的損傷小。
 
  (6)10%的CTAB溶液很粘滯,取液時(shí)可將其加熱至56℃。
 
  (7)轉(zhuǎn)移DNA溶液用的槍頭要剪去尖,避免對(duì)DNA的機(jī)械損傷。
 
  (8)所得DNA應(yīng)為白色或灰白色,若呈褐色則有多酚物質(zhì)污染。對(duì)于含多酚類(lèi)物質(zhì)多的材料,提取緩沖液中可加入1%的PVP。對(duì)于多糖含量高的材料,提取液中CTAB的濃度可增至3%或更高。

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