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嚙齒類動物顯性致死試驗儀

時間：2025/4/28閱讀：24
分享：
　　嚙齒類動物顯性致死試驗儀
 
　　一、 儀器介紹
 
　　實驗目的：
 
　　本試驗是一項生殖細胞致突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物生殖細胞的遺傳損傷,進一步確證體外試驗或其他試驗系統(tǒng)獲得的陽性結(jié)果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。
 
　　實驗概述：
 
　　哺乳動物發(fā)育中的精子在物理或化學因素作用下,發(fā)生染色體損傷,從而使受精卵在發(fā)育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現(xiàn)是受精卵著床前丟失或著床后胚
 
　　胎早期死亡。通過適當?shù)耐緩绞剐坌詣游锝佑|受試物,然后與未經(jīng)染毒且未交配過的雌性動物交配,交配結(jié)束后,取出雌性動物。雌性動物于妊娠后半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢査兩側(cè)子宮內(nèi)的胚胎植入數(shù)(著床數(shù))、早死胎、晚死胎和活胎數(shù)。雄性動物每間隔一定時間再與另一批未經(jīng)染毒且未交配過的雌性動物交配,如此共進行數(shù)批,以保證覆蓋一個精子周期。
 
　　應用范圍
 
　　應用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域
 
　　二、試驗流程
 
　　1）實驗動物：
 
　　物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠(如SD大鼠、CD-1小鼠)
 
　　數(shù)量: 每組至少15只雄鼠，設多個劑量組和陰性/陽性對照組。
 
　　雌鼠: 需未交配過的健康雌鼠，用于與雄鼠交配。
 
　　2）給藥劑量分組:
 
　　至少設3個劑量組，高劑量應出現(xiàn)輕微毒性(如體重減輕)。
 
　　陰性對照組如體重減輕(溶劑對照)和陽性對照組
 
　　給藥方式:通常為經(jīng)口灌胃，連續(xù)給藥5~7天(覆蓋精子發(fā)生周期不同階段)
 
　　3）交配程序
 
　　交配安排:雄鼠給藥后，按周次與未處理雌鼠交配(每周更換一批雌鼠，共5~6批)，以覆蓋精子發(fā)生全周期(精原細胞一精子)。
 
　　交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓(交配證據(jù))
 
　　4）觀察指標：
 
　　胚胎存活分析
 
　　雌鼠妊娠中期解剖，計數(shù)黃體數(shù)、著床數(shù)、活胎數(shù)和死胎數(shù)。
 
　　計算顯性致死率:
 
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其他指標: 雄鼠體重、睪丸重量、精子質(zhì)量等,
 
　　5）結(jié)果評價：
 
　　陽性結(jié)果:顯性致死率顯著升高(如劑量依賴性增加，或某批交配周期異常)，提示受試農(nóng)藥可能誘發(fā)生殖細胞遺傳損傷。
 
　　陰性結(jié)果:需結(jié)合其他遺傳毒性試驗綜合評估
 
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