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可溶性果膠(WSP)含量試劑盒
可溶性果膠(WSP)含量試劑盒
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48T540元1 盒 可售

更新時間:2024-06-19 10:01:37瀏覽次數(shù):325

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【簡單介紹】
級別 其他
可溶性果膠(WSP)含量試劑盒
果膠是構(gòu)成細(xì)胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸等 形式廣泛分布于植物果實(shí)、根莖和葉中。

可溶性果膠(WSP)含量試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 可溶性果膠(WSP)含量試劑盒說明書 (貨號:WS4070F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 果膠是構(gòu)成細(xì)胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸等 形式廣泛分布于植物果實(shí)、根莖和葉中。果膠和纖維素以及金屬離子等物質(zhì)相結(jié)合形成不 溶于水的原果膠,在果蔬成熟過程中轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄怨z,果實(shí)組織也變得軟化、硬度下降。 本試劑盒先提取得到可溶性果膠(WSP),采用咔唑比色法測定可溶性果膠含量。果 膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑進(jìn)行縮合反應(yīng),生成紫紅色物質(zhì),經(jīng)光譜掃描 該物質(zhì)在 530nm 處有吸收峰,顏色深淺與果膠含量成正比,進(jìn)而得可溶性果膠含量。 二、試劑盒組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 1.5mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 4℃保存 若重新做標(biāo)曲,則用到該試劑 三、所需的儀器和用品: 分光光度計、1mL 玻璃比色皿(1cm 光徑)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、乙醇、濃硫酸、 研缽。 四、可溶性果膠(WSP)含量檢測: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備: ① 取 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.2g),加 2 mL 80%乙醇,研磨勻漿,95℃水浴 25min取出流水冷卻后,8000rpm25℃離心 10min,棄上清,留沉淀, ② 向沉淀中加入 1 mL 80%乙醇混勻,95℃水浴 25min, 取出流水冷卻后,8000rpm,25離心 10min,棄上清,留沉淀, ③ 再向沉淀中加入 1 mL 蒸餾水混勻,50℃水浴 30min,流水冷卻至室溫,8000rpm,25離心 10min,棄沉淀,取上清液待測。 2、上機(jī)檢測: ① 分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長為 530nm,蒸餾水調(diào)零; ② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱 µL測定管 空白管 (僅做一次) 樣本 105 蒸餾水 105 濃硫酸 630 630 可用封口膜纏緊,85℃水浴 15min 后, 流水冷卻至室溫。 試劑一 21 21 混勻,室溫(25℃)暗處反應(yīng) 30min(間隔 10min 混勻一次),全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿中, 530nm 處讀取吸光值 A,A=A 測定-A 空白。 【注】:1、濃硫酸必須是分析純級別,且不能長期開口放置,否則影響顯色結(jié)果。另外濃硫酸具有 強(qiáng)腐蝕性,操作時需特別注意,85加熱取出后冷卻再打開蓋子,以防液體飛濺燒傷。 2、顯色反應(yīng)必須在暗處反應(yīng),否則顏色很快消失或者變淡,影響吸光值。本試劑盒僅供科研使用 2 3、若 A 測定管值大于 1.8,可用蒸餾水稀釋樣本即待檢測上清液,則稀釋倍數(shù) D 需代入公 式計算;或若 A 值再零附近可增加樣本取樣質(zhì)量 W五、結(jié)果計算: 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:y = 2.6619x-0.0141;,x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y A。 2、可溶性果膠含量(mg /g 重量) =[(ΔA+0.0141) ÷2.6619×V1]÷ (W×V1÷V)×D =0.37×(ΔA+0.0141)÷W W---樣本重量,g; V---加入提取液體積,1mL; V1---加入樣本體積,0.105mL; D---稀釋倍數(shù)。 附:標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程: 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(0.5mg/mL):臨用前向標(biāo)準(zhǔn)品中加入 2mL 蒸餾水(現(xiàn)配現(xiàn)用)。 2 把母液用蒸餾水稀釋成六個濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0,0.1,0.20.3,0.4,0.5. mg/mL。 也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)測定管的加樣表操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。



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