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在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們經(jīng)常需要對(duì)酶切、機(jī)械打斷等片段化的DNA進(jìn)行平端化處理，以便于后續(xù)與質(zhì)粒、cosmid、fosmid或BAC載體、以及二代測(cè)序的DNA adaptor等進(jìn)行連接；在進(jìn)行平末端克隆或高通量測(cè)序接頭連接實(shí)驗(yàn)中我們也需要對(duì)PCR產(chǎn)物、cDNA等進(jìn)行平端化處理。所以選擇一款好的快速平端化試劑盒對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)顯得尤為重要。

產(chǎn)品特點(diǎn)
使用便捷：本試劑盒可以將含有5’或3’突出(5’- or 3’-overhang)的雙鏈DNA轉(zhuǎn)變?yōu)閹в?’磷酸和3’羥基的平末端雙鏈DNA，通過(guò)一次反應(yīng)將雙鏈DNA快速轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢杂糜诤罄m(xù)的平末端連接反應(yīng)。
適用范圍廣：本試劑盒可以催化5’突出的補(bǔ)平(聚合酶反應(yīng))、3’突出的切平(3’外切酶反應(yīng))、5’羥基的磷酸化(5’多聚核苷酸激酶反應(yīng))和3’磷酸轉(zhuǎn)變?yōu)?’羥基(3’磷酸酯酶反應(yīng))共4個(gè)常見(jiàn)的反應(yīng)。
反應(yīng)高效：本款試劑盒經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化，可實(shí)現(xiàn)單次反應(yīng)可以使5µg的DNA平端化、5’磷酸化和3’羥基化。
效果好：本產(chǎn)品與國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品相比，具有類似的催化效果。

產(chǎn)品原理

圖1. Quick Blunting Kit催化的雙鏈DNA的平端化反應(yīng)示意圖。藍(lán)色和綠色分別代表不同的DNA序列。

產(chǎn)品效果

圖2. Quick Blunting Kit平齊化和磷酸化DNA的效果圖。1. 未加入Blunting Enzyme Mix；2. Quick Blunting Kit進(jìn)行平端化和磷酸化反應(yīng)；3. Quick Blunting Kit催化的平端化和磷酸化反應(yīng)產(chǎn)物為底物，用快速DNA連接試劑盒(D7002)進(jìn)行連接；4. 用Competitor (N公司)的Quick Blunting Kit進(jìn)行平齊化和磷酸化反應(yīng)；5. 以N公司的Quick Blunting Kit催化的平端化和磷酸化反應(yīng)產(chǎn)物為底物，用快速DNA連接試劑盒(D7002)進(jìn)行連接。如圖所示，本產(chǎn)品與N公司的產(chǎn)品相比，具有類似的催化效果。

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