分光光度計(jì)是以不連續(xù)的波長(zhǎng)對(duì)反射物體或透射物體進(jìn)行采樣的測(cè)量器，將成分復(fù)雜的光分解為光譜線。不同的物體有不同的分子結(jié)構(gòu)，不同的波長(zhǎng)對(duì)光的吸收能力也不同，所以每個(gè)物體都有特定的吸收光譜。
分光光度計(jì)使用產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，透過(guò)測(cè)量的樣品后，一部分光被吸收，樣品的吸光值被計(jì)算，轉(zhuǎn)換為樣品的濃度。在實(shí)際運(yùn)用過(guò)程中，有幾個(gè)因素導(dǎo)致儀器測(cè)量精度下降，包括以下幾點(diǎn)。
1、吸光度(透過(guò)率)精度
透射率和吸光度的誤差越大，測(cè)試結(jié)果的可靠性越差，顯然會(huì)影響測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
2、波長(zhǎng)精度
根據(jù)分光光度法的原理，照射到樣品池的單色光必須與樣品吸收光譜的任意一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)之間存在一定的誤差。
樣品中大部分的主要吸收峰有一定的寬度，波長(zhǎng)精度要求允許寬度。但是，在吸收峰寬度小且吸收峰的兩側(cè)邊緣比較陡的情況下，必須注意波長(zhǎng)精度的影響。
3、雜散光
雜散光是由光學(xué)部件的制造誤差和光學(xué)部件和機(jī)械部件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也增大，對(duì)分析結(jié)果造成一定的誤差。
在紫外短波長(zhǎng)區(qū)域，光源的強(qiáng)度和探測(cè)器的靈敏度明顯減弱，雜散光的影響不容忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的重要指標(biāo)之一。
4、基線的直線度
基線直線度是整個(gè)頻帶內(nèi)各波長(zhǎng)的噪聲表現(xiàn)，基線直線度直接影響紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度精度的靈敏度和檢測(cè)下限或使用范圍，是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)中非常重要的技術(shù)參數(shù)之一。
用戶購(gòu)買(mǎi)和使用時(shí)，基線的平直度有這一特殊的重視程度，成為購(gòu)買(mǎi)和使用的重要技術(shù)指標(biāo)。但是相對(duì)于影響儀器檢測(cè)精度的其他因素，基線的平直度是目前國(guó)內(nèi)外研究者重視程度不夠的技術(shù)指標(biāo)。
5、頻譜帶寬
光譜帶寬是影響紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度精度的重要因素。如果光譜帶寬不同，由于測(cè)試得到的數(shù)據(jù)不同，因此光譜帶寬不同，分析誤差也有很大差異。
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