產(chǎn)品信息
來自擬南芥AKIN beta gamma的klh偶聯(lián)肽,UniProt: Q944A6, TAIR: AT1G09020
主機(jī)的兔子
單克隆多克隆
親和純化的血清在PBS pH = 7,4
格式凍干
量50µg
復(fù)配時(shí),加入50µl無菌水
-20°C保存凍干/重組;一旦重組,使公平,以避免重復(fù)凍融循環(huán),請(qǐng)記住,在打開之前,旋轉(zhuǎn)管短暫,以避免任何損失,凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)
Western blot (WB)
預(yù)期|表觀MW
53 kDa
#1:裝載5μg純化的(Ni-NTA, Qiagen,制造商說明書)大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白。
2 .原生質(zhì)體樣品,AKINbg-HA在Ramon et al (2013, the Plant Journal)中過表達(dá),并在Laemmli增溶緩沖液中煮沸5min。8% SDS-PAGE分離蛋白,半干轉(zhuǎn)移印跡1h至PVDF。印跡用5%的脫脂牛奶在TBS中進(jìn)行封閉,室溫下攪拌1h。印跡用一抗1:1000稀釋,4°C攪拌12小時(shí)。去除抗體溶液,RT - TBS-T中攪拌洗滌4次,共5分鐘。印跡用二抗(抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶偶聯(lián))稀釋至1:10 000,加入1%的脫脂乳- tbs攪拌,RT加熱1h。按上述方法洗滌印跡5次,并根據(jù)制造商的說明使用ECL顯影5分鐘。重組蛋白(#1)暴露時(shí)間為20秒,原生質(zhì)體樣品(#2)暴露時(shí)間為5分鐘。