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上海飛測生物科技有限公司
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產(chǎn)品型號上海飛測
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間:2019-07-24 14:03:44瀏覽次數(shù):423次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線嘔吐毒素免疫親和柱用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇時的樣品前處理。
【概要】
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) 又稱嘔吐毒素(vomitoxin),主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。廣泛存在于,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。DON明顯的毒性作用是引起嘔吐、腹瀉、腹痛等癥狀,并延緩生長、降低免疫機(jī)能,與貧血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切l(wèi)ian系。給人、家畜的健康造成巨大威脅。
【適用范圍及性能】
嘔吐毒素免疫親和柱用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇時的樣品前處理。
柱容量:≥1200ng
回收率:≥80%
【試驗原理】
嘔吐毒素免疫親和柱的測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,然后注入到分析儀器中用于檢測。
【包裝組成】
根據(jù)不同規(guī)格,每一個盒中包含5/25支脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和層析柱及1份說明書。
【需要而未提供的設(shè)備及試劑】
設(shè)備:
1. 高速均質(zhì)器或組織勻漿機(jī)
2. 粉碎機(jī)
3. 200mL/50mL量筒
4. 天平:感量0.1g
5. 微量移液器:單道 100μL~1000μL
6. 槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
7. 玻璃微纖維濾紙(1.5μm孔徑)
8. 50mL漏斗
9. 一次性玻璃試管
10. 泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑:
1. 蒸餾水或去離子水
2. 聚乙二醇(PEG)8000
3. 色譜級甲醇
4. pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS):稱取8.0g氯hua鈉,1.2g*,0.2g磷酸er氫鉀,0.2g氯hua鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,后用純水稀釋至1000mL
【樣本處理步驟】
(一)花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料(稀釋倍數(shù)4)
1. 稱取25g粉碎的樣品,加入10g聚乙二醇8000后,用去離子水定容至200mL;
2. 轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中,均質(zhì)器高速均質(zhì)2min;
3. 4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾,取上清液,使用玻璃纖維濾紙過濾后待用;
4. 將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取2mL上述樣品提取液注入玻璃注射器;
5. 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/s流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
6. 以5.0mLPBS溶液和去離子水快速淋洗柱子1次,流速為2-3滴/s。棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;
7. 準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/s,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
(二)酒類(稀釋倍數(shù)0.5)
1. 取脫氣酒類試樣(含二氧化碳的酒類樣品使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,過濾或超聲脫氣)或其他不含二氧化碳的酒類試樣20g(精確到0.01g),加入1g聚乙二醇(4.3),用水定容至25.0mL,混勻;
2. 用玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清;
3. 將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取2mL上述樣品提取液注入玻璃注射器;
4. 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/s流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
5. 以5.0mLPBS溶液和去離子水快速淋洗柱子1次,流速為2-3滴/秒。棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;
6. 準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/s,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
【結(jié)果判定】
經(jīng)嘔吐毒素免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測。也可氮氣吹干后,復(fù)溶以提升濃度(稀釋倍數(shù)相應(yīng)變化)。
【注意事項】
1. 嘔吐毒素危害很大,應(yīng)戴手套操作。
2. 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:嘔吐毒素免疫親和柱可于常溫保存,2-8℃儲存可延長有效期,不可凍存。
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個月。
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