詳細介紹
一、試劑盒簡介
本試劑盒為包含去除基因組DNA的高效DNase的新一代快速逆轉錄試劑盒,與上一代產品相比具有更高的逆轉錄效率。試劑盒中主要包含3管成分:gDNA Remover中主要包括濃縮的DNase及Buffer;4× EZscript RT Mix II中主要包含了逆轉錄所需的所有成分(逆轉錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs、Oligo dT18、Random Hexamer等)。
本試劑盒采用的DNase及Buffer反應系統(tǒng)經過特殊的優(yōu)化,僅需室溫(25°C)反應5分鐘,就能降解95%以上的基因組DNA,*的降低了可能殘留的基因組對結果的干擾。
二、產品組分
Components | EZB-RT2GQ (100Rxns×20 µl) |
gDNA Remover*1 | 550 µl |
4× EZscript RT Mix II *2 | 220 µl |
Nuclease free ddH2O | 1 ml |
*1:包括DNase和Buffer;
*2:包括逆轉錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、Oligo(dT)18 Primer、Random Hexamer Primer等組分。
三、保存條件
本試劑盒建議置于-20℃保存。
四、試劑盒特點
1、本試劑盒為預先混好的4× EZscript RT Mix II,只需加入模板RNA和水混勻后便可以開始反應;使用了新一代逆轉錄酶,具有更強的酶活性和更高的靈敏度。
2、含有去除基因組DNA的gDNA Remover,只需室溫5分鐘即可去除基因組DNA。
3、只需42℃、15分鐘即可高效合成熒光定量PCR所需的高質量cDNA模板。
4、反轉錄引物使用了Oligo(dT)18和Random Hexamer這兩種引物的混合物,*提高了反轉錄的效率。
5、反轉錄反應可選擇多種儀器如水浴鍋、金屬浴,不局限于PCR儀。
五、注意事項
1、當同時需要進行數(shù)次反應時,應先配制各種試劑的混合液,然后再分裝到每個反應管中。這樣可使所取的試劑體積更準確,減少試劑損失,避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或實驗之間產生的誤差。
2、 gDNA Remover和4× EZscript RT Mix II在使用前需上下顛倒混勻,短暫離心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取時應慢慢吸取。同時,要使用精確、量程適合的移液槍,并且不要使Tip插入液面過深,否則會因Tip壁粘著造成損失,而使酶量不足。
3、分裝試劑時務必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染。