名稱 HCCLM3細胞(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)
別稱 LM3; MHCC-LM3; MHCCLM3
種屬 人
年齡（性別） 39歲
組織來源 肝；肝癌
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 HCCLM3細胞是一株由人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠、進行3次肺轉(zhuǎn)移篩選、取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系。HCCLM3細胞被廣泛用于人肝癌發(fā)病機理的基礎和臨床研究，也可用于抗腫瘤藥物篩選。
生長培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:2-1:4
HCCLM3細胞(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~35-48 hours
凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

細胞凍存操作要點：

1、細胞凍存前12~24h，換新鮮培養(yǎng)基，使細胞一直處于對數(shù)生長期。

2、待細胞長至80%匯合時*消化，用新鮮培養(yǎng)基吹打后制成細胞懸液，1000rpm離心10min。懸浮細胞則直接離心。

3、棄上清，加入凍存液重懸細胞沉淀，調(diào)整細胞濃度為3×106~1×107cells/mL。將細胞懸液分至凍存管內(nèi)，每管1~1.5mL，擰緊蓋子。在管壁上做好標記，標明細胞名稱、凍存日期等。

4、按下列順序依次降溫：室溫→4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃過夜→液氮保存。也可使用程序降溫盒更為方便，細胞凍存管放入程序降溫盒內(nèi)可直接放入-80℃過夜，再轉(zhuǎn)至液氮罐內(nèi)。

5、細胞凍存后應取出一管復蘇，檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內(nèi)長期保存，為穩(wěn)妥起見可在細胞凍存半年后復蘇培養(yǎng)，觀察細胞生長情況，再繼續(xù)凍存。

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