曠場實驗儀器（Open field test）

研究發(fā)現(xiàn)，動物在敞箱中，由于對于新異環(huán)境的恐懼，主要在敞箱內(nèi)的周邊部活動，而在*區(qū)活動較少，但是動物的探究本性有必然促使它試圖在敞箱的*區(qū)活動（包括活動、飲水或進(jìn)食），從而產(chǎn)生沖突行為?？菇箲]藥物在不改變動物一般運動的情況下可以增加實驗動物進(jìn)入敞箱中*區(qū)的次數(shù)和*區(qū)停留時間，或者增加實驗動物在*區(qū)的飲水時間延長，提示動物的沖突行為減少；致焦慮劑則相反，使得實驗動物在*區(qū)的活動時間或飲水時間減少，即表示動物的沖突狀態(tài)加劇。因此敞箱實驗來評價藥物的抗焦慮和致焦慮作用。因此敞箱實驗多用于焦慮或抑郁情緒的評價。人們試圖運用活動性和排便來評價動物行為。然而由于藥物可以通過與焦慮無關(guān)的機制改變動物活動，因此運動活性不適合做為焦慮指標(biāo)。開場排便發(fā)生率與動物情緒有關(guān)，但受食物攝入量、胃腸蠕動等無關(guān)因素影響，因此做為焦慮指標(biāo)并不使人滿意。為建立一個較為理想的曠場焦慮模型，行為藥理學(xué)家Stenfanski等（1992）和Stout等（1994）分別對曠場進(jìn)行改進(jìn)。

Stenfanski等使用的傳統(tǒng)的圓形曠場。直徑80cm，高30cm。曠場底部*劃有直徑分別為35cm和50cm的內(nèi)、外兩個圓圈，內(nèi)圈所包含的區(qū)域為*區(qū)；靠近底部的側(cè)壁上對稱裝有3個光電管，并可通過攝像頭觀察大鼠的活動情況。整個實驗在弱光環(huán)境、65dB的白噪音（背景聲）條件下進(jìn)行。實驗多用雄性Wistar大鼠，體重200-240g。將大鼠置于曠場*，觀察10min內(nèi)大鼠的總活動計數(shù)、進(jìn)入曠場外圈的次數(shù)和曠場*區(qū)停留時間。

Stout-Weiss法又叫曠場飲水實驗（the open field drink test,OFDT）：這是Stout和Weiss根據(jù)Britton的曠場攝食實驗改進(jìn)而成。曠場攝食實驗雖然可以用來評價藥物的抗焦慮作用，但是很多藥物本身會影響攝食，從而導(dǎo)致藥物的作用是改變焦慮狀態(tài)還是影響食欲很難區(qū)分。因此Stout和Weiss把攝食改為飲水了，再通過改進(jìn)實驗裝置和控制實驗條件使OFDT能成功區(qū)分抗焦慮劑和致焦慮劑。實驗用36cm*36cm*36cm的透明有機玻璃箱，底部為黑色，頂部敞開。箱子的*倒置懸掛一個動物飲水瓶，瓶嘴離地面10cm（大鼠使適用）。箱子正上方60cm處安裝一個25w的白熾燈照明。除一面外其余三面用黑色擋板遮擋，借以排除額外可見光源刺激。實驗前三天每天僅給實驗動物（大鼠）飲水一個小時（下午3－4點鐘），實驗前3天每天至少撫摸動物1min，借以減少非特異性應(yīng)激刺激對實驗動物的影響。實驗時，將大鼠放于曠場*部，記錄10min內(nèi)大鼠的以下指標(biāo)：開始飲水的潛伏期，飲水時間，靠近水瓶的次數(shù)以及站立次數(shù)。

曠場實驗儀器

大鼠常用的曠場為1.2m×1.2m 、1m×1m和50cm×50cm多種規(guī)格，側(cè)壁高40 cm，底板為黑色和四壁可為白色或黑色，上部敞開。曠場上方安置攝像頭記錄實驗動物在曠場中的活動情況。

實驗方法

• 實驗開始之前先將實驗動物暴露在95 dB的白噪音中1小時，然后立即放入曠場中。
• 記錄5 min內(nèi)大鼠在曠場中的活動情況，包括水平活動情況和垂直方向活動情況（直立次數(shù)）以及糞便情況。
• 每只大鼠實驗記錄結(jié)束，不僅要擦干凈其糞便及尿液，還需用5%的乙酸水溶液*清潔曠場，再用紙巾或干布擦干。

記錄數(shù)據(jù)

• 水平運動總距離――――反應(yīng)大鼠的運動情況。例如抑郁大鼠水平運動距離將大大減少，多躲避于曠場一角不動。
• *區(qū)運進(jìn)入總次數(shù)――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況。抗焦慮藥物可以在不改變一般運動情況的前提下增加大鼠的*區(qū)進(jìn)入次數(shù)。抑郁大鼠*區(qū)進(jìn)入次數(shù)也會大幅度下降。
• *區(qū)運滯留時間――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況?？菇箲]藥物可以在不改變一般運動情況的前提下增加大鼠的*區(qū)滯留時間。抑郁大鼠*區(qū)滯留時間也會大幅度下降。
• 直立次數(shù)――――反應(yīng)大鼠垂直水平活動情況，主要反應(yīng)大鼠的探究行為。抑郁大鼠對外界環(huán)境的好奇性或探究興趣下降，所以表現(xiàn)出直立次數(shù)顯著下降。
• 糞便數(shù)量――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況。但是由于糞便數(shù)受影響因素多并不能充分反映出大鼠的焦慮情況。

注意事項

• 實驗前需要對實驗動物每天撫摸1-2min以減少非特異性應(yīng)激刺激對實驗動物檢測中的影響。
• 實驗過程中需要弱光照明，觀察者盡量與測試動物分隔。
• 實驗過程中需要環(huán)境安靜。
• 進(jìn)行曠場檢測時，需要對實驗動物進(jìn)行篩選，有些實驗動物在正常情況下水平方向或垂直方向的活動情況顯著低于同批動物平均水平，則需要將這些動物預(yù)先剔除。