目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法
| 貨號 | BK-01S6886 |
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特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：熒光法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6886
產(chǎn)品分類：土壤系列
商品介紹：
測定意義: β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應用價值。 測定原理： 4-羥甲基-7-(MUB)在 365 nm波長處激發(fā), 能在 470 nm處檢測到熒光, 它與某些物質(zhì)結(jié)合后熒光特性消失, 通過酶的水解作用MUB釋放出來, 通過檢測熒光量來表征酶活性。 自備儀器和用品： 多功能酶標儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
50mL Cobalt Chloride Solution（氯化鈷溶液）,0.5M Cobalt Chloride Solution,0.5M 常溫保存
25uL Fluorescein -12- dUTP溶液 (1mM) Fluorescein -12- dUTP Solution -20℃避光保存
2 ug pIC111 pIC111 低溫運輸，-20℃保存
指示選擇性基礎 Direct selective medium-based 250g
1瓶 JeKo-1細胞株 JeKo-1 低溫運輸和保存
2.5L微需氧產(chǎn)氣包 10個/包
1000µg RecA蛋白 RecA -20℃保存
500mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.2M,pH8.0 Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
1 管 SMD1168酵母菌 SMD1168 Yeast Strain -80℃保存
2 ug pSI pSI 低溫運輸，-20℃保存
120mL 氣相RNase清除劑 Air RNase Erasol 常溫
土壤β木糖苷酶 （SβXYS）測試盒熒光法Goat Anti-Mouse IgG/Bio 標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
NRXN3 軸突蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCL26/Eotaxin 3 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
EphB2/Eph receptor B2 酪蛋白激受體B2抗體 規(guī)格: 0.1ml
REG1A 胰島細胞再生因子ICRF抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
T4/L-Thyroxine 甲狀素T4抗體 規(guī)格: 0.2ml
LRP5 脂蛋白受體相關蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
NALP6 富含亮重復結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
SEMA6D 軸突導向因子SEMA6D抗體 0.2ml
CPT1B 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1B抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
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環(huán)保在線