目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 轉氫酶1測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6565 |
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實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
轉氫酶1測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6565 |
商品介紹：
測定意義: TH位于線粒體的內膜上，又稱為線粒體復合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉化，調節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。 測定原理： NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測定375nm光吸收的增加速率，來計算TH-2活性。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
腸球菌、溶血性鏈球菌和糞鏈球菌檢驗培養(yǎng)基
50次 DNA電泳分子量標準(λDNA/EcoR I+ Hind III) DNAMETER（3） 4℃保存
2 ug pGEX-4T- 2 pGEX-4T- 2 低溫運輸，-20℃保存
PPLO瓊脂 PPLO Agar 250g
1瓶 G401細胞株 G401 低溫運輸和保存
含225ml布氏肉湯均質袋 Brucella Broth 10個/包
2000 U 限制性內切HindIII Restriction Endonuclease -20℃保存
50mL Prehybridization Solutions in SSPE Prehybridization Solutions in SSPE 常溫保存
10mL 溶液,50mg/mL Tetracycline HCl Solution -20℃保存
2 ug pQE-32 pQE-32 低溫運輸，-20℃保存
250mL 非凍型組織RNA保存液 RNALOCKER 常溫
轉氫酶1測試盒微量法PILR beta 細胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-6R Beta/CD130/gp130 白細胞介素6受體β抗體IL-6Rβ 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/AP 堿性磷酸（AP）標記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
BAT5 白細胞抗原B相關轉錄蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEOX 2 間充質同源盒蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-HMGN1(Ser20+Ser24) 磷酸化高遷移率核小體結合蛋白1 規(guī)格: 0.1ml
BCSC1 抑蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlComplement C3 beta chain 補體C3b抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-JunB(Ser79) 磷酸化活化蛋白激B抗體 規(guī)格: 0.1mlGDPD5 甘油磷酸二酯磷酸結構域5抗體 規(guī)格: 0.2ml
RPS6KA1/p90RSK/RSK1 絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlTIP47/M6PRBP1 脂滴相關蛋白TIP47抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDC2L5 細胞分裂周期2樣蛋白激5抗體 規(guī)格: 0.2mlPolyprotein(Hepatitis G Virus) 庚型毒多聚蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
IGF2BP3/IMP3 胰島素樣生因子ⅡmRNA結合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlCSFV Polyprotein 豬瘟毒抗體 規(guī)格: 0.1ml
EDG3 內皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 規(guī)格: 0.2mlC16orf57 16號染色體開放閱讀框57抗體 規(guī)格: 0.2ml
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環(huán)保在線