目錄:上海聯(lián)祖生物科技有限公司>>ELISA試劑盒>>免費代測ELISA試劑盒>> 48T/96TLPL脂蛋白脂肪酶ELISA試劑盒
| 貨號 | LZ-E028617 |
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標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
產品屬性：
產品名稱 | LPL脂蛋白脂肪酶ELISA試劑盒 |
英文名稱 | LPL ELISA Kit |
產品規(guī)格 | 48T/96T |
產品貨號 | LZ-E028617 |
需要而未提供的試劑和器材：
1. 產品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等。
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
操作步驟：
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
色素C(Cyt-C)試劑盒紫檀芪化亞銅 CP 色譜級，≥99.8%(GC)
色素C(Cyt-C)試劑盒紫菀化亞銅 CP乙丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)
脂蛋白脂(LPL)試劑盒紫云英 >99.5%1,4-二氧六環(huán) HPLC, ≥99.5%
脂蛋白脂(LPL)試劑盒棕櫚N,N'-羰二咪唑 ≥97.0% (T) 乙乙酯 for HPLC, 99.9%
糖原磷化同工II(GP-II)試劑盒棕櫚酯N,N'-羰二咪唑 99%正庚烷 農殘級, ≥99%(GC)
糖原磷化同工II(GP-II)試劑盒棕櫚乙酯N,N'-琥珀酰亞碳酯 98%正戊烷 for HPLC, ≥99.0%
糖原磷化同工MM(GP-MM)試劑盒棕矢車菊素1,2-二咪唑 99%吡啶 for HPLC, ≥99.9%
糖原磷化同工MM(GP-MM)試劑盒醉椒素4,5-二咪唑 98%四 for HPLC, ≥99.9%
糖原磷化同工BB(GP-BB)試劑盒巴咪唑 99.5%，用于緩沖溶液苯 for HPLC, 99.9%（劇品）
糖原磷化同工BB(GP-BB)試劑盒左旋箭咪唑 99.5%，用于熒光分析L-a-氨己二 98%
脂蛋白α(Lp-α)試劑盒左旋千金藤啶咪唑 99.5%，分子生物學級聚乙烯 K-value 72-71
脂蛋白α(Lp-α)試劑盒左旋肉咪唑 99%聚乙烯 K-value 68-65
骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒Ophiopojaponin C1-咪唑 99%聚乙烯 K-value 62-60
骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒Cyclocephaloside II1，1-硫代羰二咪唑 95%聚乙烯 K-value 59-55
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒Hydroxy Sprengerinin C, 17-1，1-硫代羰二咪唑 90%乙酰 AR,99%
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒Tokinolide B2,6-二硝苯 98%酰 96%
LPL脂蛋白脂肪酶ELISA試劑盒油紅屬于偶氮染料，是很強的脂溶劑和染脂劑，與甘油三酯結合呈小脂滴狀。
脂溶性染料能溶于組織和細胞中的脂類，它在脂類中的溶解度比在溶劑中大。當組織切片置人染液時，染料則離開染液而溶于組織內的脂質(如脂滴)中，使組織內的脂滴呈橘紅色。
操作步驟：
1. 先小心倒掉培養(yǎng)基，用PBS 漂洗1 次
2. 加10%中性固定30 分鐘；
3. PBS 漂洗2 次
4. 孵育液孵育5 分鐘。
5. 60℃溫箱內，油紅染液染色10min。
6. 用脫色液A 漂洗2 次。
7. 用脫色液B 漂洗2 次。
8. 復染20-60s。
9. 用脫色液B 漂洗2 次。
10. 封片保存。
11. 顯微鏡觀察，組織細胞中脂滴呈橘紅色，核呈藍色。
儲存：2～8℃，有效期一年。
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環(huán)保在線