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雞法氏囊病毒抗體檢測試劑盒

時(shí)間:2013-8-8閱讀:148
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雞法氏囊病毒抗體檢測試劑盒

(版本號(hào):2011-1)

【名    稱】

通用名: IBDV IgG抗體檢測ELISA試劑盒

【原    理】

本品系由包被IBDV 重組抗原的微孔板和酶標(biāo)記抗雞IgG及其他試劑組成,應(yīng)用酶免法原理(ELISA)檢測雞血清或卵黃中IBDV IgG抗體。

【使用意義】

雞法氏囊病是由傳染漢钷囊病毒引起的一種生接觸性傳染病。雞傳染性法氏囊炎是青年雞的一種急性、接觸性傳染病。臨本病的危害主要是病毒侵害雞的體游人免疫中樞--法氏囊,使雞的法氏囊的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生受到破壞,降低或不能產(chǎn)生免疫球蛋白,導(dǎo)致免疫機(jī)能障礙。在預(yù)防免疫工作中,zui值得關(guān)注的就是強(qiáng)化免疫的接種時(shí)機(jī)問題。該試劑盒檢測反映抗體水平,利于指導(dǎo)免疫時(shí)機(jī)。

【試劑盒組成】

  1. IBDV抗原包被微孔板條       96T×1
  2. 酶標(biāo)記物                    11ml×1
  3. 樣品稀釋液                  20ml×1
  4. 顯色劑A/B                7 ml每瓶
  5. 洗滌液(用前1:25稀釋)    20 ml×1
  6. IBDV抗體陽性對(duì)照血清      0.7 ml×1
  7. IBDV抗體陰性對(duì)照血清      0.7 ml×1
  8. 終止液                       7 ml×1

【規(guī)格】

96頭份/盒

【使用方法】

  1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
  2. 取所需用量包被微孔板條,設(shè)空白、陰性及陽性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
  3. 陰性、陽性對(duì)照孔分別加陰性、陽性對(duì)照血清100μl;樣品孔樣本1:100稀釋后加100μl;空白對(duì)照孔不加。
  4. 混勻,置37℃溫浴30分鐘。
  5. 扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置60秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
  6. 每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。
  7. 置37℃溫浴30分鐘。
  8. 洗滌,同步驟5。
  9. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
  10. 每孔加終止液50μl,混勻,置酶標(biāo)儀450nm處測各孔A值(建議用雙波長450nm、630nm)。

【結(jié)果判定】

陰性對(duì)照:正常情況下,陰性對(duì)照孔A值≤0.1;

陽性對(duì)照:正常情況下,陽性對(duì)照孔A值≥0.4;

臨界值(C.O.)的計(jì)算:臨界值=0.15+陰性對(duì)照孔均值;所有陰性、陽性對(duì)照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計(jì)算值;陰性對(duì)照孔A值大于0.10時(shí)應(yīng)舍棄,如所有陰性對(duì)照孔A值都大于0.10時(shí)須重復(fù)實(shí)驗(yàn);陰性對(duì)照孔低于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。(該cut-dff值依據(jù)瓊擴(kuò)實(shí)驗(yàn)計(jì)算得出的)

結(jié)果判定:檢測標(biāo)本A450值≥臨界值判定為本試驗(yàn)陽性;檢測標(biāo)本A450值<臨界值判定為陰性。

【注意事項(xiàng)】

操作時(shí)必須戴手套,穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。

試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。

洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫中平衡至潮氣干盡后方可,未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。

用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

不同批號(hào)試劑組分不得混用。

【保存與有效期】

于2~8℃避光保存,有效期自成品檢定合格之日起為12個(gè)月。

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