呋喃唑酮代謝物膠體金快速檢測卡

呋喃唑酮代謝物膠體金快速檢測卡

           呋喃唑酮代謝物（AOZ）快速檢測卡

使用說明書

【規(guī)格】  

         20T/盒

【適用范圍】      

 本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品（魚肉、蝦肉）組織樣本中呋喃唑酮代謝物殘留的定性檢測。

【檢測限】

          0.5ppb（單位：ng/g）  

【測定原理】

呋喃唑酮代謝物快速檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的呋喃唑酮代謝物在流動的過程中與膠體   金標記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和NC膜檢測線（T線）上的呋喃唑酮代謝物—BSA偶聯(lián)物的結(jié)合，從而導致檢測線顏色深淺的變化。當樣本中沒有呋喃唑酮代謝物或呋喃唑酮代謝物濃度低于檢測*，T線顯色強于C線顯色或與C線顯色無明顯差異；當樣本中的呋喃唑酮代謝物濃度等于或高于檢測*，T線顯色明顯弱于C線顯色或T線不顯色；而無論樣本中是否含有呋喃唑酮代謝物，質(zhì)控線（C線）都會顯色，以示檢測有效。

【產(chǎn)品組分】

【需要自備實驗儀器與耗材】

儀器：天平、離心機、氮吹儀（或空氣吹風機）、微量移液器（單道100µl-1000µl）、渦旋震蕩器、均質(zhì)機、水浴鍋；

耗材：50ml離心管、一次性槍頭、乙酸乙酯、正己烷、1M 鹽酸溶液（HCl）、1 M  氫氧化鈉溶液（NaOH）、0.1M 磷酸氫二鉀溶液 (K2HPO4)

【溶液配制】

提取劑A： 1M HCl溶液

                     取8.6ml濃HCl加去離子水定容至100ml。

提取劑B： 0.5M 磷酸氫二鉀溶液 (K2HPO4)

                              稱11.4g K₂HPO₄·3H₂O加去離子水溶解定容至100ml。

提取劑C： 1M NaOH溶液

稱取4g NaOH加去離子水定容至100ml。

【樣品制備】

水產(chǎn)品（魚肉、蝦肉）組織樣本（蝦要去掉頭和殼后*清洗干凈，魚要去鱗去骨后用均質(zhì)機打碎，并且應當避光冷藏保存，同時請先閱讀注意事項。）

1、 取5±0.05g均質(zhì)樣本于50mL離心管中，先加入4ml的去離子水（或蒸餾水），再分別加入0.5ml提取劑A和200µl衍生化試劑，充分旋渦振蕩2min。

2、 置于90℃恒溫水浴中孵育20min；

3、 分別加入1ml提取劑B和0.5ml提取劑C混合30s后再加入

5ml乙酸乙酯，充分旋渦振蕩3min；

4、 在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心5min。

5、 取出2ml上層液體于10ml離心管中，在65℃氮氣或空氣流下吹

干（若管底剩余少于100微升吹不干液體或油脂為正?，F(xiàn)象，可

直接復溶使用）。

6、 加入 1ml正己烷溶解干燥物，再加入0.5ml樣本復溶液充分混

         合30s，在室溫下（20-25℃）4000r/min以上離心3min，待其

分層。（若出現(xiàn)乳化，放置90℃恒溫水浴3分鐘后，4000r/min

以上離心3min）

7、 取100µl下層液（水層）為待檢樣品液用于分析。

（注：盡量避免吸到上層有機溶液）

【操作步驟】

1、在進行檢測前先完整閱讀使用說明書，使用前將檢測卡和待檢樣本溶液恢復至室溫。 

2、取出所需數(shù)量的金標微孔試劑（備注：剩余微孔試劑請密封好并存放于4-8℃冰箱），

3、加入100 µL待檢樣品液于金標微孔中，抽吸4-5次，充分混勻后靜置反應4min；

4、從原包裝袋中取出檢測卡，打開后平放在桌面上，請在1小時內(nèi)立即使用。

5、用移液器或滴管吸取全部金標微孔試劑液體，垂直緩慢滴加于檢測卡的加樣孔中。見圖1

6、在加樣后開始計時，在5-20min內(nèi)，用肉眼觀察測試區(qū)和質(zhì)控區(qū)，判斷結(jié)果，其他時間判斷無效。見圖2

圖1  加樣示意圖

【結(jié)果判定】

                                        圖2   結(jié)果判定示意圖

1、 陰性： T線顯色強于C線顯色或與C線顯色接近，表明樣本中不含有呋喃唑酮代謝物或是含量低于檢測限。

2、陽性：T線顯色明顯弱于C線顯色或T線不顯色，表明樣本中呋喃唑酮代謝物含量高于檢測限；

3、無效：無出現(xiàn)C線，表明不正確的操作或檢測卡已過期失效。此情況，應再次仔細閱讀說明書，并用新的試紙卡重新測。

【特異性】

本產(chǎn)品與呋喃唑酮代謝物反應率為99%；與呋喃西林代謝物、呋喃它酮代謝物、呋喃妥因代謝物均無交叉反應。

【注意事項】

1、請按照操作步驟進行測試，操作時請勿觸摸試紙顯示區(qū)；

2、進行取樣檢測操作時，蝦要去掉頭和殼后實驗，魚要去鱗后取魚背部油脂較少的部位進行實驗，為了保證實驗的準確性，盡量不要取魚肚和魚尾處油脂較多的部位進行實驗，因為較多的油脂會附著于觀測區(qū)膜面和影響側(cè)向?qū)游鱿到y(tǒng)，干擾實驗結(jié)果的準確性。

3、如購買時發(fā)現(xiàn)過期，破損，污染，無效的產(chǎn)品，請到購買處進行更換；

4、本品為一次性產(chǎn)品，啟封后，立即使用；請勿重復使用；

5、樣品從冰箱中取出或經(jīng)處理后，請勿立即加到樣品孔中，應待樣品溫度恢復至室溫（20±5℃）后，再進行檢測（肉樣的溫度不高于25℃）;

6、不能用其他不明液體作為陰性樣品檢測對照;

7、本品為樣本初篩試劑，有局限性，若遇到判定結(jié)果有爭議的樣品，請用儀器方法作進一步確證;

8、廢棄物應妥善處理；切勿重復使用配備的滴管，以免交叉污染；切勿食用配備的試劑；

【儲存條件】

原包裝儲存于（4-30℃）陰涼避光干燥處，切勿冷凍和日曬注：長期保存宜存放溫度為（4-8℃）。

【有效期】

有效期18個月;生產(chǎn)日期、有效期、批號見外包裝盒。