百螢-Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒產(chǎn)品簡介

時(shí)間：2023/6/15閱讀：80

中文名：細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒

英文名： CCK-8 Cell Counting Kit-8

產(chǎn)品貨號： TJ35001.TJ35002.TJ35003.TJ35004.TJ35000

供應(yīng)商： AAT Bioquest

產(chǎn)品規(guī)格： TJ35001：5ml，TJ35002:10ml,TJ35003:30ml,TJ35004:100ml,TJ35000:1ml

產(chǎn)品參數(shù)

Ex (nm)： -

Em (nm)： -

分子量： -

溶劑： -

存儲條件：在零下15度以下保存, 避免光照

Cell Counting Kit-8(cck-8)細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒工作原理

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒是百螢生物生產(chǎn)的一種基于 WST-8 的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜（formazan)。WST-8 被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺;顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的熒光探針。

	CCK-8法	MTT法	MTS法	SRB法	XTT法	WST-1法
溶解性	水溶	難溶	水溶	水溶	水溶	水溶
檢測波長	450nm	490nm	450nm	510nm	450nm	450nm
外觀	液體	固體	液體	液體	固體	液體
是否需要重新溶解	不需要	需要	不需要	需溶于Tris堿	需要	不需要
便捷性	+++	++	+++	+	++	+++
檢測效率	++++	+	++	+	++	++
可重復(fù)性	+++	+	++	++	+	++
穩(wěn)定性	+++	+	+	+++	+	++
1.MTT法：MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。 2.MTS法：以生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ)，比色分析對顯色反應(yīng)的基本要求是：反應(yīng)應(yīng)具有較高的靈敏度和選擇性，反應(yīng)生成的有色化合物的組成恒定且較穩(wěn)定，它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)和控制好適宜的反應(yīng)條件，是比色分析的關(guān)鍵。 3.SRB法：磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)比色法，主要用來檢測細(xì)胞增殖情況。SRB是一種粉紅色陰離子染料，易溶于水，在酸性條件下可特異性地與細(xì)胞內(nèi)組成蛋白質(zhì)的堿性氨基酸結(jié)合；在510 nm左右波長下產(chǎn)生吸收峰，吸光值與細(xì)胞量成線性正相關(guān)，故可用作細(xì)胞數(shù)的定量檢測。 4.XTT法：XTT是一種與MTT類似的四唑氮衍生物，可被活細(xì)胞線粒體脫氫酶還原成水溶性的棕色甲肷產(chǎn)物，當(dāng)XTT與電子偶合劑共同使用時(shí)，甲肷的生成量與細(xì)胞的增殖程度呈正相關(guān)。 5.WST-1法：WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜（Formazan）。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。

Cell Counting Kit-8(cck-8)細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒活力計(jì)算

活力計(jì)算：
細(xì)胞活力*（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100

A（加藥）：具有細(xì)胞、CCK8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細(xì)胞、CCK8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力

CCK-8實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵點(diǎn)（供參考）：

1. 種板數(shù)；

2. 2.種板后細(xì)胞的貼壁生長時(shí)間；

3. 3.加藥后的孵育時(shí)間；

4. 4.CCK-8試劑加入量；

5. 5.CCK-8試劑加入后細(xì)胞孵育時(shí)間

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