Amplite 熒光法丙三醇檢測(cè)試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測(cè)丙三醇的試劑盒，甘油是合成肝臟和脂肪組織中甘油三酯和磷脂的前體。禁食時(shí)，儲(chǔ)存在這些脂滴中的甘油三酯可被水解以產(chǎn)生游離甘油和脂肪酸。 釋放到血流中的游離甘油的量與甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率成正比，甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率在代謝調(diào)節(jié)和熱量產(chǎn)生中是重要的。 Amplite 熒光甘油測(cè)定試劑盒提供了一種靈敏的基于熒光的測(cè)定方法，用于測(cè)量生物樣品中的甘油水平。 該測(cè)定基于甘油的酶偶聯(lián)反應(yīng)，其中產(chǎn)物過(guò)氧化氫可以在HRP偶聯(lián)反應(yīng)中使用我們的Amplite HRP底物檢測(cè)。 熒光信號(hào)可以通過(guò)Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)量。 使用此熒光甘油測(cè)定試劑盒，我們能夠在100μL反應(yīng)體積中檢測(cè)到低至0.015 mg / L（?0.16μM）的甘油。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法丙三醇檢測(cè)試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備甘油工作溶液（50 µL）
2.加入甘油標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50 µL）
3.在室溫下孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測(cè)Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的熒光增加

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Amplite HRP底物儲(chǔ)備液（200X）：
將50 µL DMSO（組分E）添加到Amplite HRP底物（組分A）的小瓶中，制成200X Amplite HRP底物原液,避光。

1.2 甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 mg / mL）：
將1 mL ddH2O或1x PBS緩沖液添加到小瓶甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液（組分D）中，制成1 mg / mL甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

甘油標(biāo)準(zhǔn)
將10μL的1 mg / mL甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到990μL的1x PBS緩沖液中，以生成10μg/ mL的甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液（GS7）。取10 µg / mL甘油標(biāo)準(zhǔn)溶液（GS7），并在1x PBS緩沖液中進(jìn)行1：3系列稀釋，以得到系列稀釋的甘油標(biāo)準(zhǔn)液（GS6-GS1）。

3.工作溶液

3.1 將5 mL測(cè)定緩沖液（組分C）加入一瓶酶混合物（組分B）中，并混合均勻。

3.2 將25 µL 200X Amplite HRP底物原液添加到組分B + C的瓶子中，并充分混合以制成甘油工作液。 注意：這種甘油工作溶液足以用于一個(gè)96孔板。 它不穩(wěn)定，請(qǐng)及時(shí)使用。