操作步驟

簡要概述

準(zhǔn)備Helixyte 綠色工作溶液
在每個(gè)0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液（Cat＃：CCT100）
將10μLDNA標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品加入每個(gè)試管中
在室溫下孵育2分鐘
使用CytoCite 熒光分析儀或Qubit 熒光分析儀監(jiān)測熒光

溶液制備

Helixyte Green 工作溶液制備：
為10個(gè)樣品制備足夠的工作溶液，將10μL Helixyte Green （組分A）加入2 mL DNA分析緩沖液（組分B）中。 注意：用鋁箔覆蓋或?qū)⑵渲糜诤诎抵校员Ｗo(hù)工作溶液免受光照。 注意：我們建議將此溶液用塑料容器而不是玻璃制備，因?yàn)槿玖峡赡軙?huì)吸附到玻璃表面。 為獲得佳效果，該溶液應(yīng)在其制備后幾小時(shí)內(nèi)使用。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

       樣品體積是1~20μL（取決于DNA樣品的估計(jì)濃度）。推薦樣品體積為10μL，DNA濃度范圍為0.5~10 ng /μL。如果使用其他樣品量，請(qǐng)?jiān)跐舛扔?jì)算中調(diào)整稀釋倍數(shù)。

1.基于10μL樣品體積生成以下方案，DNA濃度在0.5~10 ng /μL范圍內(nèi)。

1.1在每個(gè)Cytocite 樣品管（＃CCT100）或等效的0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液注意：使用薄壁聚丙烯，透明的0.2 mL PCR管，如＃CCT100。

1.2將DNA標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品10μL加入每個(gè)試管中，然后渦旋混合2~3秒。

1.3讓所有試管在室溫下孵育2分鐘。

1.4將樣品插入CytoCite 或Quibit ，并用綠色熒光通道監(jiān)測熒光。按照適用于CytoCite 熒光分析儀的步驟進(jìn)行操作。詳細(xì)說明請(qǐng)點(diǎn)擊查看。

2.標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線的制備

       對(duì)于Portelite 分析，您可以選擇使用DNA標(biāo)準(zhǔn)制作校準(zhǔn)曲線。 以下是生成定制DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線的簡要方案：

2.1用DNA Assay Buffer進(jìn)行稀釋，得到10,8,6,4,2,1,0.5,0 ng /μLDNA標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。

2.2將190μLHelixyteGreen 工作溶液加入0.2 mL PCR管中。

2.3每管加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品或10μL樣品。

2.4在室溫下孵育反應(yīng)2分鐘。

2.5將樣品插入CytoCite 并用綠色熒光通道檢測熒光。