Zn2+檢測(cè)樣品分析方案

概述

測(cè)試樣品（50μL）或Zn2+

添加鋅探針試劑50μL

在室溫下孵育5-10分鐘讀取A610nm / A480nm的吸光度比

操作步驟

1.ZnCl2標(biāo)準(zhǔn)品和試樣制劑：

1.1將10μL的100mM ZnCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液（組分C）加入990L測(cè)定緩沖液（組分B）中，得到1mM ZnCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2將10μL的1mM鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液（組分C）加入到990L測(cè)定緩沖液（組分B）中，得到100μMZnCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3取300μL的100μMZnCl2標(biāo)準(zhǔn)溶液（來自步驟1.2）進(jìn)行1：2連續(xù)稀釋，得到50,25,12.5,6.25,3.13,1.56和0μM連續(xù)稀釋的ZnCl2標(biāo)準(zhǔn)品。

1.4用測(cè)定緩沖液（組分B）將測(cè)試樣品稀釋至5-100μM范圍。加入50μLZnCl2標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋樣品并對(duì)照到每個(gè)孔中，如說明書中的表1和2所示。

2.運(yùn)行鋅測(cè)定：

2.1將25μLZn-620（組分A）加入5 mL測(cè)定緩沖液（組分B）中以制備Zn測(cè)定混合物。 向ZnCl2標(biāo)準(zhǔn)品，空白對(duì)照和測(cè)試樣品的每個(gè)孔中加入50μLZn測(cè)定混合物（參見說明書中步驟1.5，表1和2）以使總ZnCl2測(cè)定體積為100μL/孔。

注意：對(duì)于384孔板，每孔加入25μL樣品和25μL測(cè)定反應(yīng)混合物。

2.2在室溫下孵育反應(yīng)5-10分鐘，避光。

2.3用吸光度讀板儀在610 nm和480 nm處檢測(cè)吸光度的增加。