樣品實驗方案

簡要概述

1.用測試化合物（200μL/樣品）制備細胞
2.添加Apopxin Green檢測溶液
3.在室溫下孵育20-60分鐘
4.使用FL1通道的流式細胞儀分析細胞（Ex / Em = 490/525 nm）

操作步驟

1.用測試化合物處理細胞一段所需的時間（用喜s堿處理的Jurkat細胞4-6小時）以誘導細胞凋亡。注意：對粘附細胞的Apopxin 結合流式細胞術分析不是常規(guī)檢測，因為在細胞分離或收獲期間可能發(fā)生特定的膜損傷。然而，Casiola-Rosen等人先前報道了利用膜聯(lián)蛋白V對貼壁細胞類型進行流式細胞術的方法。

2.離心細胞，得到1-5×105個細胞/管。

3.將細胞重懸于200μL測定緩沖液（組分B）中。

4.將2μLApopxin Green（組分A）加入細胞中。

5.可選：將2μL100X碘化丙啶（組分C）加入細胞中，用于壞死細胞。

6.在室溫下孵育20至60分鐘，避光。

7.可選：在使用流式細胞儀分析細胞之前，添加200至300μL的測定緩沖液（組分B）以增加體積。

8.使用具有FL1通道的流式細胞儀（Ex / Em = 490 / 525nm）監(jiān)測熒光強度。當?shù)饣ぜ尤爰毎麜r，使用FL2通道測量細胞活力。