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Ex?(nm)	406	Em?(nm)	445

Cell Meter 細(xì)胞活性檢測試劑盒藍(lán)色熒光 該試劑盒有多種參數(shù)可用于監(jiān)控細(xì)胞活力。試劑盒中使用的專有的紫色激光激發(fā)熒光染料是一種疏水性化合物，可輕松滲透完整的活細(xì)胞，并在進(jìn)入活細(xì)胞后獲得增強(qiáng)的熒光。細(xì)胞內(nèi)酯酶對非熒光底物的水解產(chǎn)生了強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光產(chǎn)物，該產(chǎn)物很好地保留在細(xì)胞質(zhì)中。通過非熒光底物的酯酶水解產(chǎn)生的藍(lán)色熒光團(tuán)具有熒光素的光譜特性。當(dāng)在405 nm激發(fā)時，熒光團(tuán)在?450 nm處發(fā)出強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。該試劑盒提供了所有必需成分，并具有用于熒光微孔板檢測的優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。此Cell Meter 細(xì)胞活力分析試劑盒為熒光流式細(xì)胞術(shù)，微孔板和細(xì)胞功能的顯微鏡研究提供了標(biāo)記細(xì)胞的有效工具。它可用于多種研究，包括細(xì)胞粘附，趨化性，多藥耐藥性，細(xì)胞生存力，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性。該試劑盒適用于增殖和非增殖細(xì)胞。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的Cell Meter 細(xì)胞活性檢測試劑盒藍(lán)色熒光。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

加入相同體積的CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
監(jiān)測Ex / Em = 405/460 nm（截止= 435 nm）的熒光強(qiáng)度（底部讀取模式）

溶液配制

儲備溶液配制

CytoCalcein™Violet 450，AM儲備溶液：

將20 µL DMSO（組分B）添加到CytoCalcein™Violet 450，AM（組分A）的小瓶中，并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450，AM儲備溶液。注意：20 µL CytoCalcein™Violet 450，AM儲備液足以裝滿一塊板。避光。為了存放，請將管子緊緊密封。

工作溶液配制

將CytoCalcein™Violet 450，AM儲備溶液的全部內(nèi)容物（20 µL）加入10 mL的測定緩沖液（組分C）中，并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液。該CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液在室溫下至少可穩(wěn)定2小時。注意：如果諸如CHO細(xì)胞之類的細(xì)胞含有能促進(jìn)熒光染料隨時間滲漏的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，則應(yīng)制備丙*舒儲備溶液并以孔內(nèi)工作濃度范圍為1至1的濃度添加到上樣緩沖液中。 2.5毫米分裝并保存未使用的丙*舒儲備溶液于≤-20°C。

操作步驟

根據(jù)需要用測試化合物處理細(xì)胞。注意：添加化合物之前不必洗滌細(xì)胞。但是，如果測試的化合物對血清敏感，則可以在添加化合物之前將生長培養(yǎng)基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔（96孔板）和25 µL /孔（384孔板）的1X Hank鹽溶液和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或抽吸后選擇的緩沖液?；蛘?，細(xì)胞可以在無血清培養(yǎng)基中生長。
加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的CytoCalcein™Violet 450，AM工作溶液。
在避光的條件下，于室溫或37°C下孵育平板1小時。（孵育時間可能是15分鐘到過夜。孵育時間少于4小時，我們獲得了結(jié)果）。注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于所用的單個細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。優(yōu)化每個實(shí)驗(yàn)的孵育時間。注意：加載后請勿洗滌細(xì)胞。注意：對于非貼壁細(xì)胞，建議在孵育后以800 rpm的速度離心細(xì)胞板2分鐘，然后制動。
使用熒光板讀數(shù)器（底部讀取模式）在Ex / Em = 405/460 nm（截止= 435 nm）下監(jiān)控?zé)晒鈴?qiáng)度。