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當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 22904Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒

Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號22904

品       牌AAT Bioquest

廠商性質代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-31 18:04:59瀏覽次數(shù):478次

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張經理

biolite
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產地 進口 產品種類 流式細胞儀
Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒提供了一種靈敏的一步熒光測定法,可在培養(yǎng)一小時后檢測活細胞中的細胞內ROS。該試劑盒針對流式細胞儀應用進行了優(yōu)化

活性氧(ROS)是氧正常代謝的天然副產物,在細胞信號傳導中起重要作用。但是,在與氧化應激相關的狀態(tài)下,ROS水平會急劇增加。 ROS的積累會嚴重破壞細胞結構。氧化應激在心血管疾病,糖尿病,骨質疏松癥,中風,炎性疾病,許多神經退行性疾病和癌癥中的作用已得到*。 ROS檢測將有助于確定氧化應激如何調節(jié)各種細胞內途徑。該使用我們*的Amplite ROS Green熒光定量活細胞中的ROS,Amplite ROS Green具有細胞滲透性。與ROS反應時會生成綠色熒光。 Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒提供了一種靈敏的一步熒光測定法,可在培養(yǎng)一小時后檢測活細胞中的細胞內ROS。該試劑盒針對流式細胞儀應用進行了優(yōu)化,其信號可以通過Ex / Em = 490/520 nm(FL1通道)進行檢測。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供的Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒。

適用儀器


流式細胞儀
Ex:488 nm
Em:530/30   nm
通道:FITC 通道
實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備密度為0.5-1×106細胞/ mL的細胞
2.在0.5 mL細胞懸液中加入1 µL 500X Amplite ROS Green
3.在37℃下將細胞染色1小時
4.處理細胞以誘導ROS
5.使用帶有FL1通道的流式細胞儀分析細胞(Ex / Em = 490/520 nm)


溶液配制

1.儲備溶液配制

       除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環(huán)。

Amplite ROS綠色儲備溶液(500X):將100 µL DMSO(組分C)添加到Amplite ROS Green(組分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Green儲備液。 避光。 注意:要存放,請密封管。有關細胞樣品制備的指南,請點擊查看。


操作步驟

1.對于每個樣品,以0.5×105至1×106細胞/ mL的密度在0.5 mL測定緩沖液(組分B)或自備緩沖液中制備細胞。注意:應單獨評估每個細胞系,以確定誘導ROS的細胞密度。

2.將1 µL 500X Amplite ROS Green儲備溶液加入0.5 mL細胞懸液中。

3.在37oC下孵育1小時。注意:對于貼壁細胞,用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整,并在與Amplite ROS Green孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。合適的孵育時間取決于所用的單個細胞類型和測試化合物,優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

4.通過在所需的緩沖液(例如PBS或HBSS)中添加50 µL 11X測試化合物來處理細胞。對于對照孔(未處的細胞),添加相應量的緩沖液。

5.將細胞在37oC下孵育,以誘導ROS(避光)。注意:我們在37℃下用100 µM TBHP(氫過氧化叔丁基)處理Jurkat細胞30分鐘,以誘導ROS。有關詳細信息,請參見圖1。

6.使用具有FL1通道(Ex / Em = 490/520 nm)的流式細胞儀檢測熒光強度。



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