美國必能信超聲波破碎儀用于粉碎動(dòng)植物細(xì)胞、細(xì)菌、孢子或組織，提取細(xì)胞中的蛋白質(zhì)，進(jìn)行病毒和疫苗的科學(xué)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。它利用強(qiáng)超聲波在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng)，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行超聲波處理，從而為實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用帶來行業(yè)內(nèi)的樣品處理解決方案。
細(xì)胞破碎方法：
1、機(jī)械破碎法：指使用搗碎器、研磨機(jī)或均質(zhì)機(jī)破碎細(xì)胞。
1、高速組織搗碎：將材料混合成稀糊狀，放入約1/3體積的圓筒中，蓋緊圓筒，先將調(diào)速器調(diào)到最慢位置，然后啟動(dòng)開關(guān)，逐漸加速到所需速度。該方法適用于動(dòng)物內(nèi)臟、植物肉質(zhì)種子等。
2、用玻璃勻漿器勻漿：首先將切好的組織放入試管中，然后放入研磨棒中來回研磨，上下移動(dòng)研磨細(xì)胞。這種方法比高速組織搗碎器具有更高的細(xì)胞破碎程度，并且適用于少量的動(dòng)物器官和組織。
二、物理破碎法：是指利用溫差、壓差或超聲波破碎細(xì)胞。
1、用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液，使細(xì)胞劇烈震蕩破碎(細(xì)胞壁和細(xì)胞器因超聲波的振動(dòng)力而破碎)。機(jī)理：可能與強(qiáng)聲波作用于溶液時(shí)氣泡產(chǎn)生、長大、破裂的空化現(xiàn)象有關(guān)，空化現(xiàn)象產(chǎn)生的沖擊波和剪刀力引起細(xì)胞裂解。超聲波破碎的效率取決于音頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意冷卻，防止過熱)。
2、高壓破碎：細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)形間隙噴射到靜止的沖擊環(huán)上，并被迫改變方向，通過出口管流出。在此過程中，細(xì)胞經(jīng)歷了由高速和從高壓到常壓的變化引起的剪切碰撞，從而破裂并釋放出內(nèi)含物。這是溫和而地破碎細(xì)胞的理想方法。
3、反復(fù)凍融法：將細(xì)胞冷凍在-20以下，室溫融化。反復(fù)地，由于細(xì)胞中冰粒的形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度的增加，細(xì)胞膨脹，這破壞了細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
三、化學(xué)破碎法：指用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)被破壞或通透性改變。十二烷基磺酸鈉(SDS)和脫氧膽酸鈉可損傷一些動(dòng)物細(xì)胞，如腫瘤細(xì)胞。一般濃度為1mg/ml。
4、酶法破碎法：選擇合適的酶破壞細(xì)胞壁，然后在低滲溶液中破碎原生質(zhì)體。
細(xì)菌的細(xì)胞壁比較厚，可以用進(jìn)行更好的治療。
裂解物的標(biāo)準(zhǔn)配方：50 mm Tris-HCl (pH 8.5 ~ 9.0)，2 mm EDTA，100 mm NaCl，0.5% Tritonx-100，1 mg/ml。(在這個(gè)pH范圍內(nèi)效果很好)。
總結(jié)：無論采用哪種方法破碎組織細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)或核酸水解酶都會(huì)釋放到溶液中，導(dǎo)致大分子生物降解，造成天然產(chǎn)物減少。加入氟磷酸二異丙酯(DFP)可以抑制或減緩自溶。碘乙酸的加入可以抑制活性中心需要疏水基團(tuán)的蛋白水解酶的活性，苯(PMSF)的加入也可以消除蛋白水解酶的活性，但不是全部，粉碎的同時(shí)要分幾次加入。此外，通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度，這些條件應(yīng)該適合于目標(biāo)物質(zhì)的提取。
