天根試劑-高保真PCR-pcr反應(yīng)預(yù)混液NG219

天根試劑-高保真PCR-pcr反應(yīng)預(yù)混液NG219 TIANSeq HiFi Amplification Mix 是一種高保真PCR擴(kuò)增預(yù)混液，適用于高通量測(cè)序文庫的PCR擴(kuò)增和其他PCR相關(guān)的克隆和檢測(cè)。

    擴(kuò)增預(yù)混液中的Ultra HiFi DNA Polymerase是通過定向分子進(jìn)化技術(shù)開發(fā)得到的新型快速高保真DNA聚合酶，增強(qiáng)了DNA聚合酶對(duì)模板的親和力，使得此酶在擴(kuò)增速度和延伸能力上得到了提升，增加了PCR成功率和產(chǎn)物量。同時(shí)，此酶具有優(yōu)良的3'- 5'外切酶活性（Proofreading活性），保真性可達(dá)市場(chǎng)上主流產(chǎn)品水平，保證了基因和文庫擴(kuò)增過程中的真實(shí)性。此外，本產(chǎn)品中的DNA聚合酶具有熱啟動(dòng)（Hot Start）功能，可有效的控制低溫情況下的非特異擴(kuò)增和酶活損耗，進(jìn)而保證了PCR擴(kuò)增的特異性和穩(wěn)定性。
   為一管式預(yù)混Mix形式，內(nèi)含熱啟動(dòng)型的Ultra HiFi DNA Polymerase、超純dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液等PCR反應(yīng)所需組分，只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，操作簡(jiǎn)便。除此之外，預(yù)混Mix中還整合了PCR反應(yīng)增強(qiáng)系統(tǒng)，不但提高了預(yù)混Mix的穩(wěn)定性，使得聚合酶對(duì)PCR反應(yīng)抑制劑的耐受能力增強(qiáng)，還提高了Ultra HiFi DNA Polymerase對(duì)不同GC含量模板的適應(yīng)能力，使得本產(chǎn)品具有廣泛的樣品普適性和模板投入范圍， 具有降低PCR反應(yīng)的偏好性。
   pcr反應(yīng)預(yù)混液NG219的PCR產(chǎn)物為平末端，可加A處理再與T載體連接或直接使用平末端克隆載體進(jìn)行基因克隆，如TIANGEN零背景快速連接試劑盒（目錄號(hào)：VT205）。

產(chǎn)品特點(diǎn)

 擴(kuò)增快速：延伸速度可達(dá)10-15 sec/kb；  延伸力強(qiáng)：可擴(kuò)增長(zhǎng)至15 kb的DNA片段；
 特異性好：具有熱啟動(dòng)功能，可用于多重PCR；
 靈敏度高：模板用量可低至10 pg；
 偏好性低：針對(duì)不同GC含量的模板都有均衡的擴(kuò)增效果；
 應(yīng)用廣泛：可用于高通量測(cè)序文庫的PCR擴(kuò)增和其他PCR相關(guān)的克隆和檢測(cè)。

適用范圍

    用于DNA的高保真快速擴(kuò)增，如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變、基因組點(diǎn)突變的分析 （SNP）等；更可用于高通量測(cè)序中，如高保真基因組DNA文庫的富集。 

實(shí)驗(yàn)例

實(shí)驗(yàn)1

使用分子信標(biāo)法（Ma et al., Anal Biochem, 2006）檢測(cè)不同高保真酶的熱啟動(dòng)性。所有產(chǎn)品均宣傳其具有熱啟動(dòng)能力，但檢測(cè)結(jié)果表明這些產(chǎn)品中只有 UltraHiFi在95度時(shí)才被激活，其余產(chǎn)品在40-50 度時(shí)均有鏈退火和延伸能力。

實(shí)驗(yàn)2

使用 Lac I法檢測(cè)酶的保真性。TIANGEN UltraHiFi的保真性是普通 Taq酶的50倍以上

實(shí)驗(yàn)3

實(shí)驗(yàn)4

實(shí)驗(yàn)5