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NK-92細(xì)胞-人惡性非霍奇金淋巴瘤的自然殺傷細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-06-17 08:28:56瀏覽次數(shù):237次

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NK-92細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性;鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和Daudi細(xì)胞。K-92細(xì)胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽(yáng)性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面標(biāo)記陰性。

NK-92細(xì)胞-人惡性非霍奇金淋巴瘤的自然殺傷細(xì)胞


 貨號(hào):TCH-C292 

規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞名稱:人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞

細(xì)胞別稱:NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK

細(xì)胞簡(jiǎn)稱:NK-92

產(chǎn)品貨號(hào):TCH-C292

種屬來(lái)源:人

組織來(lái)源:淋巴

疾病特征:惡性非霍奇金淋巴瘤

細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

培養(yǎng)體系:α-MEM+12.5% FBS+12.5%HS+0.2mM肌醇+0.1mM +0.02mM+200U/mLIL-2+1%P/S

配套培養(yǎng)基貨號(hào):TCH-G292


 NK-92細(xì)胞是從一位患有急進(jìn)性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來(lái)的一株IL-2依賴型NK細(xì)胞株。NK-92細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性;鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和Daudi細(xì)胞。NK-92細(xì)胞(經(jīng)過(guò)照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細(xì)胞的功能。NK-92細(xì)胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽(yáng)性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面標(biāo)記陰性。


傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次

傳代周期:48-72 h

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃

凍存條件:60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO,液氮儲(chǔ)存

質(zhì)量檢測(cè):細(xì)菌、真菌、支原體檢測(cè)均為陰性


人惡性霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

NK-92細(xì)胞-人惡性非霍奇金淋巴瘤的自然殺傷細(xì)胞  培養(yǎng)要點(diǎn)

 1. NK92細(xì)胞為懸浮生長(zhǎng),大部分細(xì)胞聚集成團(tuán),少數(shù)細(xì)胞分散,并且細(xì) 胞間隙會(huì)有較多的死細(xì)胞和細(xì)胞碎片;

 2. NK92細(xì)胞對(duì)IL-2敏感。培養(yǎng)基中IL-2降解,將導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差。IL-2 在-20℃解凍后置于4℃冰箱保存,4℃保存不應(yīng)超過(guò)一周。配制好的新鮮培養(yǎng)基 要盡快用完,建議每次使用前拿出來(lái)預(yù)熱,使用完畢后放回4℃冰箱保存;

 3. NK92細(xì)胞對(duì)離心敏感。正常培養(yǎng)時(shí),換液周期為2~3天,建議交替使用 半量換液和離心換液法,即半量換液2~3次后,離心全量換液一次。盡量減少離 心次數(shù),細(xì)胞狀態(tài)不佳或細(xì)胞量少的時(shí)候,一般不建議離心; 

4. NK92細(xì)胞對(duì)機(jī)械力較敏感。正常培養(yǎng)時(shí),應(yīng)盡量避免吹打力道過(guò)大。 暴力吹打會(huì)使死細(xì)胞和細(xì)胞碎片增加。 

5. 正常培養(yǎng)時(shí),NK 92細(xì)胞團(tuán)的間隙有部分死細(xì)胞和細(xì)胞碎片是正常的, 如細(xì)胞碎片過(guò)多,可通過(guò)低速離心去除部分細(xì)胞碎片(800rpm,5min)。

 6. 血清質(zhì)量差異可能引起細(xì)胞狀態(tài)變化,建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。 

7. 細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí),聚集的細(xì)胞團(tuán)會(huì)逐漸增大,正常的細(xì)胞團(tuán)在顯微鏡下呈現(xiàn) 白色透亮狀。若細(xì)胞聚集太多,出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)中部發(fā)暗時(shí),可傳代; 8. 細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)要求很高,在正常培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)避免細(xì)胞團(tuán)塊太大, 這會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不足;細(xì)胞團(tuán)塊過(guò)大時(shí),需要稍微吹散,注意控制吹打次數(shù),不需 刻意吹散成單個(gè)細(xì)胞。

 9. NK92的傳代方法:將細(xì)胞團(tuán)用移液器輕輕吹散,均分到兩個(gè)瓶子里, 每瓶再補(bǔ)充等量培養(yǎng)基。 

10. NK92的凍存方法:細(xì)胞凍存的時(shí)候,細(xì)胞需要盡量分散,否則影響凍存效果。

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