天根試劑盒FP209-Talent熒光定量檢測(cè)試劑 -熒光定量pcr試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
     天根試劑盒FP209-Talent熒光定量檢測(cè)試劑 -熒光定量pcr試劑盒 采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real-Time PCR的專用試劑，可對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行快速、特異性的定量檢測(cè)。優(yōu)化的預(yù)混液可縮短Real-Time PCR的反應(yīng)時(shí)間，適用于標(biāo)準(zhǔn)或快速PCR儀。
     2 × Talent qPCR PreMix采用了抗體修飾的Anti Taq DNA聚合酶，配合優(yōu)化的qPCR Buffer體系可確保本產(chǎn)品在所有的Real-Time PCR儀上進(jìn)行高靈敏的快速qPCR反應(yīng)，qPCR反應(yīng)時(shí)間可縮短50%。此外，Buffer中添加了的H-Competitor因子和EP組分，還使得本產(chǎn)品具有廣泛的樣本普適性，對(duì)具有復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)的模板、PCR抑制劑殘留較多的模板以及長(zhǎng)片段擴(kuò)增等具有非常好的適用性。同時(shí)本產(chǎn)品還具有高擴(kuò)增效率，高擴(kuò)增特異性和寬廣的可信范圍等特點(diǎn)，在不影響PCR效果的前提下更快獲得結(jié)果，節(jié)約科研時(shí)間和能源。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
●  高靈敏的抗體修飾聚合酶，反應(yīng)時(shí)間縮短一半
●  H-Competitor因子競(jìng)爭(zhēng)氫鍵，特別應(yīng)對(duì)高GC模板、復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)模板和長(zhǎng)片段模板
●  EP組分穩(wěn)定PCR體系，有效的保護(hù)酶活，抵御各種抑制劑的干擾
●  無(wú)色透明管代替棕色管，小改動(dòng)蘊(yùn)含大智慧

下游應(yīng)用

適用于在各類熒光定量?jī)x器上采用SYBR Green 法進(jìn)行表達(dá)分析及核酸檢測(cè)等類型實(shí)驗(yàn)，尤其適合高GC、復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)殘留量高及長(zhǎng)片段模板定量時(shí)使用。

實(shí)驗(yàn)例：

圖1. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及國(guó)外A 公司（中）、B 公司（右）的同類產(chǎn)品定量人類UH11 基因（GC：73.4%），展示擴(kuò)增曲線、熔解曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線。DNA 使用量分別為20 ng，2 ng，200 pg，20 pg，2 pg。結(jié)果顯示，與競(jìng)品相比TIANGEN FP209對(duì)于5個(gè)濃度梯度定量清晰，Ct 值靠前，熔解曲線峰型正常，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)高。TIANGEN FP209 對(duì)高GC 模板具有良好的適應(yīng)性和擴(kuò)增效率。

圖2. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及國(guó)外A 公司（中）、B 公司（右）的同類產(chǎn)品定量人類H2 基因，模板為使用TIANGEN KG203 粗提的人類293T 細(xì)胞系的基因組DNA（具有較多雜質(zhì)），展示擴(kuò)增曲線和熔解曲線。展示擴(kuò)增曲線和熔解曲線。結(jié)果顯示，與競(jìng)品相比TIANGEN FP209 定量Ct 值靠前，熔解曲線峰型正常。TIANGEN FP209 對(duì)雜質(zhì)含量高的模板具有優(yōu)秀的抵抗力，保持較高的擴(kuò)增效率。

圖3. a：FP209（左）與FP205（右）包裝管對(duì)比。使用無(wú)色透明管包裝可以清楚看到管內(nèi)剩余試劑量以及是否融化。b. 分別使用-20℃避光保存的FP209（左）與室溫光照放置10 小時(shí)的FP209（右），定量不同起始濃度的人類H2 基因，展示擴(kuò)增曲線、熔解曲線和Ct 值（U.D.:Undetected）。結(jié)果顯示，兩組結(jié)果無(wú)明顯差異，光照對(duì)定量結(jié)果無(wú)影響，使用無(wú)色透明管包裝不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。

1. 2 × Talent qPCR PreMix采用了抗體修飾的Anti Taq DNA聚合酶，配合特制的快速qPCR Buffer體系，可大大縮短變性、退火與延伸時(shí)間，可節(jié)省多達(dá)50%的反應(yīng)時(shí)間，快速獲得 實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 2. 本產(chǎn)品中特別添加了H-Competitor因子，能夠競(jìng)爭(zhēng)氫鍵、增強(qiáng)雙鏈的打開強(qiáng)度，使本產(chǎn)品具 有廣泛的樣本普適性，對(duì)具有復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)的模板和長(zhǎng)片段擴(kuò)增等具有非常好的適用性。

 3. 本產(chǎn)品特制的快速PCR Buffer體系含有的PCR穩(wěn)定因子——EP，能夠有效的保護(hù)酶 活，抵御各種PCR抑制劑的干擾，保證了2 × Talent qPCR PreMix高擴(kuò)增效率，高擴(kuò)增 特異性、高擴(kuò)增靈敏度和寬廣的可信范圍的特點(diǎn)。

 4. 2 × Talent qPCR PreMix中預(yù)混有SYBR Green I，PCR反應(yīng)液配制時(shí)，只需加入模板、 引物、滅菌蒸餾水便可進(jìn)行快速Real-Time PCR反應(yīng)，操作簡(jiǎn)單方便。

 5. 本產(chǎn)品附帶ROX Reference Dye，用于消除信號(hào)本底以及校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào) 誤差，方便客戶針對(duì)不同型號(hào)熒光定量PCR儀時(shí)選擇對(duì)應(yīng)濃度使用。 

6. 2 × Talent qPCR PreMix采用無(wú)色透明管包裝，經(jīng)檢測(cè)，光照不會(huì)影響體系的定量的結(jié)果。 

試劑盒原理 

本產(chǎn)品采用了特異的抗體修飾熱啟動(dòng)DNA聚合酶進(jìn)行快速PCR擴(kuò)增，通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程中 SYBR Green I 的熒光強(qiáng)度，達(dá)到檢測(cè)PCR產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的，適用于標(biāo)準(zhǔn)和快速PCR儀。

 1. 本產(chǎn)品中特異的抗體修飾熱啟動(dòng)DNA聚合酶，95℃條件下孵育3 min即可激活全部酶活， 在縮短變性時(shí)間的同時(shí)避免了非特異性產(chǎn)物的擴(kuò)增，可大大縮短變性、退火和延伸時(shí) 間，使PCR總運(yùn)行時(shí)間縮短50%，更快獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而不影響PCR反應(yīng)效果。

 2. 本產(chǎn)品的快速PCR Buffer體系添加了的H-Competitor因子和EP組分，配合精心優(yōu)化 的快速PCR Buffer體系，對(duì)具有復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)的模板、PCR抑制劑殘留較多的模板以及 長(zhǎng)片段擴(kuò)增等具有非常好的適用性。

 3. 本產(chǎn)品針對(duì)cDNA模板和gDNA模板結(jié)構(gòu)組成的差異，對(duì)PCR的體系反應(yīng)步驟進(jìn)行了特別 的優(yōu)化，使較難擴(kuò)增的gDNA模板也能獲得良好的PCR結(jié)果。

 注意事項(xiàng)

 1．如果試劑沒有混勻，其反應(yīng)性能會(huì)有所下降。使用時(shí)請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻，請(qǐng)不要使用 振蕩器進(jìn)行混勻，盡量避免出現(xiàn)泡沫，并經(jīng)瞬時(shí)離心后使用。

 2．引物純度對(duì)反應(yīng)特異性影響很大，建議使用PAGE級(jí)別以上純化的引物。 

3．引物終濃度為0.3 μM可以在大多數(shù)體系中獲得良好的擴(kuò)增結(jié)果。如果需要進(jìn)一步優(yōu)化， 可以在 0.2-0.5 μM范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。 

4．20 μl反應(yīng)體系中，cDNA模板的使用量一般小于100 ng，基因組DNA模板量一般小于50 ng，逆 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板時(shí)，使用量應(yīng)不超過(guò)PCR體系終體積的20%。