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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2023-06-18 08:48:47瀏覽次數(shù):277次

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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)作用下,會(huì)逐漸分化成前成脂細(xì)胞和脂肪細(xì)胞,將形成大小不一的脂滴。油紅O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度,從而使脂肪著色呈現(xiàn)紅色或橘紅色。產(chǎn)品適用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo),能提高誘導(dǎo)效率。

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基

英文名稱:Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit

貨號(hào):BMRS-D101 

規(guī)格:200 mL/Kit

 質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn) pH:7.2~7.4

 內(nèi)毒素含量:<10 EU/mL 

生物安全:細(xì)菌、真菌、支原體檢測陰性 

質(zhì)量檢測:誘導(dǎo)測試合格

產(chǎn)品組分

規(guī)格


HyCyteTM 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒 

Rabbit Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Adipogenic Differentiation Kit

 貨號(hào):BMRB-D102 

規(guī)格:400 mL/Kit 

成分2

兔骨髓干細(xì)胞

| 使用說明

 1. 成脂誘導(dǎo)分化操作 

1.1 接種干細(xì)胞 取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞, 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細(xì)胞密度接種至培養(yǎng)器皿,于 37℃, 5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 90~99%,棄掉 上清,加入成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液。 

NOTE:如細(xì)胞貼壁性較差,建議使用 0.1%明膠對(duì)培養(yǎng)底 面進(jìn)行包被。

 1.2 細(xì)胞分化誘導(dǎo) 于 37℃,5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約 3 天,更 換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基維持液,培養(yǎng) 1 天后, 再更換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液,繼續(xù)培養(yǎng) 3 天。 按照以上換液頻率誘導(dǎo) 14~21 天,并注意觀 察細(xì)胞形態(tài)變化。根據(jù)細(xì)胞誘導(dǎo)形成的脂滴數(shù)量 和大小,決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時(shí)間,并進(jìn)行染色 鑒定。 

2. 染色鑒定

 2.1 細(xì)胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量 1×PBS 清洗一次,棄去 后取適量 4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面,室 溫固定 30~60 min,棄去固定液再使用 1×PBS 清 洗兩次。

 2.2 油紅 O 染色 取生理鹽水或1×PBS與油紅O原液配制油紅 O工作液(油紅O原液: 生理鹽水=3:2),現(xiàn)用現(xiàn) 配。配制后可對(duì)油紅O工作液進(jìn)行離心,以沉淀 染色液中的過飽和析出物。向清洗干凈的誘導(dǎo)孔 內(nèi)加入適量油紅O工作液,靜置染色30min。吸走 油紅O工作液,用1×PBS清洗兩次,并加入適量1 ×PBS避免細(xì)胞干燥。

 2.3 誘導(dǎo)評(píng)估 顯微鏡下觀察成脂染色效果,并進(jìn)行圖像采 集和誘導(dǎo)評(píng)估。誘導(dǎo)成功時(shí),脂滴與油紅 O 染料 結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細(xì)胞的成脂分化水平因細(xì)胞類型、細(xì)胞供體來 源,培養(yǎng)條件、細(xì)胞代次、細(xì)胞狀態(tài)和分化時(shí)間等因素而異。

成骨干細(xì)胞誘導(dǎo)分化

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