色譜柱技術(shù)發(fā)展促進了高效液相色譜法在藥物分析中更為廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜法(HPLC)已成為藥物分析，特別是多組分分析和雜質(zhì)控制中重要、廣泛的分析技術(shù)之一。由于色譜柱是液相色譜分離的核心，開發(fā)新型或高性能的高效液相色譜填料(又稱為填充劑、固定相)，提供多種色譜柱類型一直是色譜研究中豐富、有活力、富于創(chuàng)造性的內(nèi)容。下面，我們來看看實驗室儀器-色譜柱分類及選購方法。

　　如今，色譜柱技術(shù)的不斷改進創(chuàng)新，填料種類的日益豐富，分離模式和分離方法的逐步完善，為分離分析科學(xué)描繪了一幅幅絢麗的圖景新頒布的2015 年版《中國藥典》自2015 年12月1 日起正式實施。新版藥典的變化是將原來各部的附錄整合成了第四部，形成通則并對通則制定了更為合理的編碼，液相色譜法列于2015 年版《中國藥典》(四部)中通則0512 中。

　　在色譜分析中，如何選擇的色譜條件以實現(xiàn)理想的分離，是色譜工作者的重要工作。色譜是一種分離分析的手段，分離是核心，因此可以說擔(dān)負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。因此選擇一個合適的色譜柱非常重要。

　　色譜柱可分正相模式色譜柱、反相模式色譜柱和親水模式柱：

　　正相模式色譜柱：采用極性固定相(如乙二醇、氨基與腈基等鍵合相);常用于分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。

　　反相模式色譜柱：一般用非極性固定相，以硅膠為基質(zhì)鍵合不同的基團(如C18、C8);適用于分離非極性和極性較弱的化合物。反相色譜(RPC)在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用多，據(jù)統(tǒng)計它占整個HPLC應(yīng)用的80%左右。由于超臨界色譜的崛起，一些過去用正相色譜的實驗逐漸被超臨界色譜所代替，所以反相色譜柱的應(yīng)用將會更加廣泛。隨著色譜柱填料的快速發(fā)展，某些無機樣品或易解離樣品的分析也可用反相色譜法。為控制樣品在分析過程的解離，常用緩沖鹽控制流動相的pH 值。硅膠基質(zhì)鍵合相(C8和C18)色譜柱使用的pH 值通常為2.5～7.5(2～8)，太高的pH 值會使硅膠溶解，太低的pH 值會使鍵合的烷基脫落。近年來技術(shù)的更新，利用包被、空間位阻、雜化顆粒等新技術(shù)，已經(jīng)可以使硅膠基質(zhì)的色譜柱使用范圍擴大到pH 為1～12，流動相為較強酸性或堿性時，可選擇寬pH 值的色譜柱。

　　親水(HILIC)模式：HILIC不同于反相色譜技術(shù)，流動相為反相色譜的流動相，它提供了相對于反相的互補選擇性，通?？杀Ａ魝鹘y(tǒng)反相色譜方法無法保留的高極性化合物。需要注意的是HILIC模式中硅膠基質(zhì)無鍵合相的色譜柱，流動相pH 適用范圍。

　　對色譜柱的基礎(chǔ)要求是：柱效高、選擇性好，分析速度快等。目前市售的用于HPLC的各種色譜柱種類繁多，從色譜柱填料來分，可分為硅膠基質(zhì)和有機雜化球基質(zhì)的色譜柱，還有不同長短、不同微粒大小的色譜柱。

　　色譜柱的選擇可根據(jù)待分析樣品的極性、分子量大小、是否可溶于水等因素來考慮。如樣品分子量大于2000的，可溶于水的，可選擇凝膠色譜柱、大孔徑反相色譜柱、大孔徑離子交換色譜柱。分子量小于2000的，溶于有機相的，可選擇正相模式色譜柱。溶于水，可電離的樣品可選擇反相模式色譜柱或離子交換或未經(jīng)涂漬親水模式的色譜柱等。

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