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熒光染料簡易指南

閱讀:77發(fā)布時(shí)間:2022-3-28

  熒光染料(或稱熒光素)常用作細(xì)胞成像和流式細(xì)胞術(shù)等多種應(yīng)用的檢測試劑。熒光染料可吸收特定波長的光能,然后以更長的波長重新發(fā)射光能。熒光染料吸收和發(fā)射光的波長分別構(gòu)成熒光染料的激發(fā)和發(fā)射光譜(或簡稱為熒光染料光譜)。
 
  流式細(xì)胞儀或其它需要使用熒光染料的儀器配備有激光器,激光器能產(chǎn)生特定波長的光,從而激發(fā)能吸收該特定波長的光的熒光染料。然后該熒光染料發(fā)射的光通過濾光鏡,因此每個(gè)傳感器只能檢測到一定范圍內(nèi)的被濾光鏡濾過的熒光。所檢測的熒光即為儀器所識(shí)別的信號(hào)。
 
  目前已研發(fā)了許多不同的熒光染料,每種都具有特定的發(fā)射和激發(fā)光譜?,F(xiàn)在,在整個(gè)可見光譜范圍(包括紅外區(qū)域)內(nèi)可以吸收并發(fā)射特定波長的光的熒光染料都已經(jīng)商品化。此外,熒光染料發(fā)射光的強(qiáng)度也有區(qū)別。熒光染料的亮度取決于其吸收光的能力和吸收光轉(zhuǎn)化為發(fā)射光的效率。
 
  如果不借助合適的工具,選擇適用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的熒光染料可能比較困難。如果所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)為需要兩種或更多種熒光染料的多色實(shí)驗(yàn)時(shí), 選擇熒光染料將變得更加困難。在多色實(shí)驗(yàn)中,必須注意熒光染料之間的光譜重疊以及其它因素,才能盡量減少可能出現(xiàn)的問題,例如熒光溢出。

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