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技術(shù)文章
雙向擴(kuò)散試驗(yàn)
點(diǎn)擊次數(shù):389 發(fā)布時(shí)間:2012-5-24
在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散,在zui恰當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線,觀察這種沉淀線的位置、形狀以及對(duì)比關(guān)系,可作出對(duì)抗原或抗體的定性分析。雙向擴(kuò)散也可分為試管法和平板法。
(一)試管法
試管法由Oakley首先報(bào)道。先在試管中加入含抗體的瓊脂,凝固后在中間加一層普通瓊脂,冷卻后將抗原液體加到上層。放置后,下層的抗體和上層的抗原向中間瓊脂層內(nèi)自由擴(kuò)散,在抗原與抗體濃度比例恰當(dāng)處形成沉淀線。此法分析效果與Oudin法相似,在臨床檢驗(yàn)中罕用。
(二)平板法
平板法由Ouchterlony首先報(bào)道,是抗原抗體鑒定的zui基本方法之一。該法的基本步驟是:在瓊脂板上相距3—5mm打一對(duì)孔,或者打梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相對(duì)的孔中加入抗原或抗體,置室溫或37C環(huán)境中,18—24h后,凝膠中各自擴(kuò)散的抗原和抗體可在濃度比例適當(dāng)處形成可見的沉淀線。根據(jù)沉淀線的形態(tài)和位置等可作如下4種分析。