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更新時間:2022-09-06 17:59:25瀏覽次數(shù):221次

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實現(xiàn)常規(guī)熒光共聚焦成像和快速光譜成像的結合隨著科研人員需求的不斷增加,探測到更多的信號甚至是光譜信息變得越來越必要,尤其在區(qū)分顏色比較接近的熒光的時候

詳細介紹

實現(xiàn)常規(guī)熒光共聚焦成像和快速光譜成像的結合

隨著科研人員需求的不斷增加,探測到更多的信號甚至是光譜信息變得越來越必要,尤其在區(qū)分顏色比較接近的熒光的時候。創(chuàng)新的A1si激光共聚焦顯微鏡帶給用戶的靈活性,高速度以及光譜功能,遠遠超出常規(guī)共聚焦顯微鏡。配備的常規(guī)熒光探測器和光譜探測器,可以滿足多種科研領域的應用需求。


 

單次掃描即可獲得320nm帶寬的光譜圖像
波長分辨率可以是2.5, 5,和 10 nm. 選用10 nm分辨率時, 單次掃描可獲得的波長范圍高達320 nm,遠遠超出其他類似系統(tǒng)。
 簡單,靈活的顯微鏡控制
只需單擊一個圖標,即可實現(xiàn)目鏡觀察和共聚焦拍攝之間的光路切換。通過A1si的系統(tǒng)軟件,用戶可以輕松控制顯微鏡的各個部件,將更多的時間用于拍攝圖像。
 透射光拍攝
在拍攝光譜圖像和標準共聚焦圖像的同時,A1si還可以拍攝包括DIC,明視場,相差在內的透射光圖像,以便在組織和細胞中更好的進行熒光標記的定位。
 FRAP觀察
通過macro程序,可以進行FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching光漂白后的熒光恢復) 實驗. 激光精確定位到用戶的任意區(qū)域(圓形,矩形,任意多邊形,點,線,甚至環(huán)形)進行光漂白。其他FRAP技術,包括iFRAP (interval FRAP) 和FLIP (Fluorescence loss in Photobleaching)同樣得到支持。
 對光譜圖像進行時間動態(tài)記錄
由于單次拍攝即可得到全光譜圖像,所以A1si可以對光譜圖像進行動態(tài)拍攝。拍攝時間序列的模式有:模式/固定時間間隔模式/用戶自定義拍攝時間表模式)
 對熒光信號進行光譜拆分,消除串色
A1si 軟件可以將不同熒光探針的信號清楚地拆分開,包括光譜接近,大范圍重疊的熒光信號(比如CFP, RFP, YFP,和 Alexa488). 在觀察多重熒光染色來定位蛋白分子, FRET 實驗時,這個功能非常有用.通過光譜拆分,還可以清除掉自發(fā)熒光信號。
 高效率的熒光透過技術
熒光光纖和探測器表面都使用了高效防反射涂層,將熒光信號的損失降到,實現(xiàn)光路的高透過率。
 高波長分辨率
通過使用精密設計的衍射光柵,可以實現(xiàn)高達2.5nm的光譜分辨率.此外還有5nm 和 10nm分辨率可選。不同的分辨率可以分別用來拆分光譜重疊的探針或同時對4個或更多的探針進行拍攝。
 采用偏光控制技術的光譜探測器
Nikon的DEES (Diffraction Efficiency Enhancement System衍射效率增強系統(tǒng)) 技術可以對偏振光進行控制,從而實現(xiàn)亮度的。通過調整偏振光方向,衍射光柵的效率得到化,從而在從藍到紅的整個可見光范圍內提高廣譜數(shù)據(jù)的亮度和線性。
拍攝到真實的熒光顏色
由于采用了新的精確矯正技術,而且光譜分辨率和針孔大小無關,A1si可以精確探測到光譜信號,得到真實顏色。同其他的偽彩色系統(tǒng)相比,A1si可以實時觀察到真彩色的樣本。
用 A1si得到的廣譜數(shù)據(jù)和探針制造商提供的數(shù)據(jù)非常接近。
 把對活細胞和組織的影響降到
通過單次激發(fā)就可以得到全光譜圖像,因此激光強度和PMT增益的調節(jié)變得簡單而快速。同時把熒光信號的衰減以及激光對標本的損傷降到。對于活細胞和組織,A1si是一套“溫柔”的系統(tǒng)。

 同時拍攝32通道的光譜圖像
A1si 采用了32 通道PMT,并革新了多重高速數(shù)字轉換電路和LVDS(Low Voltage Differential Signal低壓差分信號)高速串行傳輸技術,創(chuàng)造性地實現(xiàn)了單詞掃描得到32通道光譜信息,大大減少了拍攝時間,并實現(xiàn)了實時觀察。
 雙積分信號處理
 

新開發(fā)的DISP (Dual Integration Signal Processing雙積分信號處理) 技術提高了電子效率,避免了模/數(shù)轉換過程中熒光信號的損失。整個曝光期間,熒光信號得到全程記錄,有效提高了信噪比。


 


 

 


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