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更新時(shí)間:2025-01-25 12:28:14瀏覽次數(shù):76次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線了解生命過程的分子機(jī)制是預(yù)防和治療癌癥等各種疾病的關(guān)鍵
了解生命過程的分子機(jī)制是預(yù)防和治療癌癥等各種疾病的關(guān)鍵。磁鑷單分子操縱系統(tǒng)是當(dāng)今流行的單分子操縱設(shè)備之一,可以對單個(gè)生物大分子進(jìn)行力學(xué)操縱并實(shí)時(shí)高精度測量其構(gòu)象變化的性質(zhì)。
磁鑷技術(shù)
磁鑷(Magnetic Tweezers),是一種利用超順磁球?qū)ι锎蠓肿舆M(jìn)行力學(xué)操縱的技術(shù)。bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)是一款商業(yè)化的獨(dú)立儀器,包括Olympus的研究型倒置式顯微鏡、對單分子操縱進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)的照明和自動對焦系統(tǒng)、以及磁鑷技術(shù)所具有的的運(yùn)動控制系統(tǒng)。整個(gè)磁鑷系統(tǒng)在集成的計(jì)算機(jī)軟件的控制下,可以方便的進(jìn)行單分子力學(xué)響應(yīng)、構(gòu)象轉(zhuǎn)變的測量。
原理
超順磁球在磁場中會被磁化并具有一定的能量,如果磁場是非均勻的,磁化的超順磁球會受到磁場梯度的方向的力的作用。通過控制外加磁場的強(qiáng)度和梯度,可以控制磁球上受到的拉力的大小。磁鑷可以施加的拉力范圍從0到數(shù)百皮牛頓(pico Newton)。
在測量方面,通過對磁球的顯微圖像分析,可以得到所研究的分子的伸長的信息,達(dá)到納米級別的精度。通過高速相機(jī)來采集磁球的的顯微圖像,時(shí)間分辨率可以達(dá)到毫秒級別。
主要技術(shù)特點(diǎn):
? 單分子操縱
? 恒定拉力控制
? 毫秒級別時(shí)間分辨率
? 穩(wěn)定性:對單分子數(shù)小時(shí)到數(shù)天的連續(xù)測量
? 可擴(kuò)展性:可以結(jié)合商業(yè)倒置顯微鏡的各種功能,如熒光成像等
? 高性價(jià)比
bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)
bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)作為一個(gè)高度靈活的單分子檢測儀器,其商業(yè)化的研究型倒置顯微鏡平臺給用戶定制和個(gè)性化需求提供了多重選擇。
? 通過增加轉(zhuǎn)動馬達(dá),實(shí)現(xiàn)對雙螺旋DNA的扭轉(zhuǎn)與超螺旋研究
? 通過改變磁鐵的尺寸,實(shí)現(xiàn)不同范圍內(nèi)拉力的高精度標(biāo)定與控制
? 通過不同的磁鐵設(shè)計(jì),實(shí)現(xiàn)分子拉伸的高精度測量和分子扭轉(zhuǎn)的高精度測量
? 商業(yè)化研究型倒置顯微鏡可以對光學(xué)路徑進(jìn)行方便的調(diào)整,以實(shí)現(xiàn)不同的實(shí)驗(yàn)要求
? 可以與各種熒光顯微鏡,如共聚焦、全內(nèi)反射等結(jié)合使用
bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)與其他單分子操縱系統(tǒng)對比優(yōu)勢:
? 與AFM力譜技術(shù)對比:bioPSI磁鑷可以實(shí)現(xiàn)更高精度的拉力控制,無需反饋系統(tǒng)就實(shí)現(xiàn)恒定外力測量,無機(jī)械漂移,可以實(shí)現(xiàn)長時(shí)間穩(wěn)定測量。
? 與AFS力譜技術(shù)對比:磁鑷樣品制備簡單,每次采用新的蓋玻片組裝實(shí)驗(yàn)用的微流腔,杜絕交叉污染。bioPSI磁鑷可以實(shí)現(xiàn)更高精度的拉力控制,無需反饋系統(tǒng)就實(shí)現(xiàn)恒定外力測量。
? 與光鑷對比:系統(tǒng)穩(wěn)定性更強(qiáng),bioPSI磁鑷可以實(shí)現(xiàn)更高精度的拉力控制,無需反饋系統(tǒng)就實(shí)現(xiàn)恒定外力測量。系統(tǒng)維護(hù)工作簡單,無需專業(yè)人員進(jìn)行定期維護(hù)。對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境無特殊要求。
? 與其他磁鑷系統(tǒng)對比:bioPSI磁鑷基于研究型倒置顯微鏡,特殊的照明和磁鐵設(shè)計(jì)可以實(shí)現(xiàn)更大的拉力范圍。易于擴(kuò)展。的控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)無漂移長時(shí)間測量。
磁鑷單分子操縱系統(tǒng)的應(yīng)用
? 蛋白質(zhì)折疊
? 高分性
? DNA、RNA穩(wěn)定性與動力學(xué)
? 分子間相互作用
高精度力學(xué)及長度測量
不同于光鑷和原子力顯微鏡等其他單分子操控技術(shù),磁鑷是直接控制施加到所研究的分子上的拉力的大小。并且可以根據(jù)磁球的熱運(yùn)動直接對拉力進(jìn)行標(biāo)定。在已知磁鐵和其磁場的性質(zhì)的情況下,一兩分鐘就可以對不同磁球的拉力進(jìn)行準(zhǔn)確的標(biāo)定,誤差小于10%。
在使用高倍數(shù)油鏡的情況下,我們改進(jìn)了磁鑷的照明系統(tǒng),使得磁球的顯微圖像對焦平面的變化非常敏感,可以實(shí)現(xiàn)小于2納米的伸長測量精度。
高數(shù)據(jù)量的去折疊力的測量(DNA G4結(jié)構(gòu)的測量)
同樣得益于bioPSI磁鑷單分子操控系統(tǒng)的超級穩(wěn)定性,如果所研究的分子在拉力減小或去除時(shí)可以重新回復(fù)到初始狀態(tài),我們就可以重復(fù)對其進(jìn)行多次循環(huán)的測量。這樣在一個(gè)分子上就可以得到幾百次甚至更多的測量數(shù)據(jù),這對于統(tǒng)計(jì)分析是非常重要和便利的。
不同于光鑷和原子力顯微鏡等其他單分子操控技術(shù),磁鑷是直接控制施加到所研究的分子上的拉力的大小。并且可以根據(jù)磁球的熱運(yùn)動直接對拉力進(jìn)行標(biāo)定。在已知磁鐵和其磁場的性質(zhì)的情況下,一兩分鐘就可以對不同磁球的拉力進(jìn)行準(zhǔn)確的標(biāo)定,誤差小于10%。
在使用高倍數(shù)油鏡的情況下,我們改進(jìn)了磁鑷的照明系統(tǒng),使得磁球的顯微圖像對焦平面的變化非常敏感,可以實(shí)現(xiàn)小于2納米的伸長測量精度。
bioPSI磁鑷單分子操控系統(tǒng)的外力控制和伸長測量系統(tǒng)獨(dú)立,并輔以的自動穩(wěn)定系統(tǒng),可以對單個(gè)分子進(jìn)行長達(dá)數(shù)小時(shí),甚至若干天的連續(xù)測量。
圖中所示數(shù)據(jù)是對I27蛋白質(zhì)進(jìn)行的8個(gè)小時(shí)的平衡態(tài)折疊與去折疊的磁鑷實(shí)驗(yàn)測量數(shù)據(jù),所用的拉力是4.5皮牛。傳統(tǒng)的原子力顯微鏡技術(shù)由于機(jī)械漂移方面的限制,只能在幾秒中內(nèi)完成測量,所得到的拉力經(jīng)常到200皮牛,由于原子力顯微鏡的測量是遠(yuǎn)離平衡態(tài)的,所以很多向小力平衡態(tài)情況的外推是錯(cuò)誤的。而磁鑷的直接測量可以得到精確的結(jié)果。
DNA與蛋白質(zhì)相互作用的動態(tài)測量
對于DNA,可以是雙鏈B-DNA,也可以是單鏈DNA,都具有特定的彈性性質(zhì)與伸長。當(dāng)其與蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用時(shí),復(fù)合物的彈性性質(zhì)和伸長會發(fā)生變化。磁鑷不僅可以測量穩(wěn)定的DNA-蛋白質(zhì)的復(fù)合物的彈性性質(zhì),也可以測量其相互結(jié)合或解離的動態(tài)過程。
bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)的規(guī)格參數(shù):
? 長度測量分辨率:小于2納米
? 拉力校準(zhǔn)精度:小于10%
? 拉力范圍:對于2.8微米直徑順磁球,拉力零到上百皮牛
? 工作穩(wěn)定性:單分子測量大于8小時(shí)
? 測量采樣率:大于100赫茲,樣品容許情況下可以優(yōu)化到500赫茲
? 磁鐵位置控制精度:小于5微米
? 磁鐵旋轉(zhuǎn)控制精度:小于0.1度
bioPSI磁鑷單分子操縱系統(tǒng)基本配置:
? 研究級倒置顯微鏡,100X油鏡
? 閉環(huán)壓電陶瓷物鏡控制器
? 高速CCD相機(jī)
? 高精度電動平動平臺
? 高精度電動轉(zhuǎn)動平臺(可選)
? 磁鑷系統(tǒng)控制器
? 集成控制系統(tǒng):實(shí)時(shí)操控、數(shù)據(jù)采集與分析
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