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禽流感H7N9新型病毒PCR檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地廣州市

聯(lián)系方式:全國東查看聯(lián)系方式

更新時間:2016-08-08 11:42:21瀏覽次數(shù):416次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:1563條

所在地區(qū):廣東廣州市

聯(lián)系人:全國東 (市場總監(jiān))

產(chǎn)品簡介

禽流感H7N9新型病毒PCR檢測試劑盒

詳細(xì)介紹

 H7N9禽流感病毒檢測試劑盒, H7N9禽流感病毒診斷試劑盒, H7N9試劑盒

 

H7N9禽流感病毒核酸熒光PCR測定試劑盒
Avian influenza virus (H7N9) Real Time RT-PCR Kit
H7N9禽流感病毒試劑產(chǎn)品專線:189 2505 2681
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:禽流感病毒H7N9核酸測定試劑盒
英文名稱:Avian influenza virus (H7N9) Real Time RT-PCR Kit
【包裝規(guī)格】 25T/盒
【預(yù)期用途】通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進行定性檢測,可用于臨床對可疑感染患者的病原學(xué)鑒別診斷。
【檢驗原理】本試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù),對禽流感H7N9特異性核酸片段進行熒光PCR檢測。
【試劑盒主要組成成份】

 

序號
組分
數(shù)量
體積/人份
1
H7N9核酸熒光PCR檢測混合液
480?l×1
19?l
2
RT-PCR酶
28?l×1
1?l
3
DEPC-H2O
400?l×1
4
陽性對照品
30?l×1

 

 
說明:不同批號的組分不可以互換使用。
自備試劑:Trizol;氯仿;75%乙醇;異丙醇或磁珠法RNA提取試劑;本公司可以代為訂購或提供銷售商。
【儲存條件和有效期】 試劑盒應(yīng)在-20℃及以下溫度避光保存,有效期12個月。采用冰盒行運輸;熒光PCR檢測混合液反復(fù)凍融不宜超過3次。
【適用儀器】 本試劑盒適用于ABI7000,ABI7300,ABI7500,ABI7900,MJ-chromo4,MX3000P,MX3005PSmartCyclerⅡ,Rotor-Gene6000Lightcycler R480,iCycleriQ4iCycleriQ5,Bio-Rad CFX96SLAN等多色熒光PCR儀及相應(yīng)軟件。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或*置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測?!緳z驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得科研許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100?l氯仿, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,*循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45×10min; 95×15min;循環(huán)一次,再按95×15sec→60×60sec,循環(huán)45;單點熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
備注:如使用ABI系列PCR儀,請務(wù)必于passive reference 和 quencher處均選擇none。
5. 閾值設(shè)定
閾值設(shè)定原則以閾值線剛好超過DEPC-H2O的zui高點。
6. 質(zhì)量控制:試劑盒各對照品須達到以下要求,否則實驗視為無效。

 

Ct值
FAM通道(檢測H7)
HEX/VIC/JOE(檢測N9)
DEPC-H2O
UNDET或45
UNDET或45
陽性對照品
≤35
≤35

 

 
7. 試驗結(jié)果的判斷

 

通道
Ct值
結(jié)果判斷
1
FAM+HEX
UNDET或45
樣本低于檢測限,報告為陰性
2
FAM+HEX
≤43
FAM通道為H7基因陽性;
HEX/VIC/JOE通道為N9基因陽性
3
FAM+HEX
43~45
復(fù)檢一次,如仍為43~45,則報告為陰性

 

 
進行定量檢測時,儀器生成標(biāo)準(zhǔn)曲線后,自動顯示待檢樣品定量值。
【參考值范圍】陰性(檢測對象H7N9為病原微生物,在健康人體中不存在)。
【對檢驗結(jié)果的解釋】實驗室環(huán)境污染,試劑污染,樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果。
【檢驗方法的局限性】當(dāng)檢測樣本中被檢核酸濃度含量低于zui低檢測限5×103copies/ml時可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】zui低檢測限:1×103copies/ml
【注意事項】 開始檢測前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格分在三區(qū)進行:PCR反應(yīng)體系的配制區(qū);標(biāo)本處理、加樣區(qū);PCR擴增、熒光檢測及結(jié)果分析區(qū)。各區(qū)使用的儀器、設(shè)備、耗材和工作服應(yīng)獨立。實驗后即請清潔工作臺,并進行消毒。
2. 使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套經(jīng)常替換) 、一次性離心管、自卸式移液器和帶濾嘴吸頭。
3. 試劑準(zhǔn)備和標(biāo)本處理應(yīng)使用超凈工作臺負(fù)壓式或防污染罩,以防止對環(huán)境污染。
4. 每次實驗應(yīng)設(shè)置陰、陽性對照品。
5. 操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn),具有一定經(jīng)驗和操作技能。
6. 操作臺、移液器、離心機、PCR擴增儀等儀器設(shè)備應(yīng)經(jīng)常用10%次氯酸或75%酒精、紫外線燈或臭氧消毒處理。
7. 實驗中接觸過標(biāo)準(zhǔn)品和對照品的廢棄物品(如吸頭)、擴增完畢的離心管、標(biāo)本等應(yīng)進行無害化處理后方可丟棄。
8. 試劑使用前應(yīng)在常溫下充分融化并混勻。
9. PCR反應(yīng)混合液應(yīng)避光保存。
10. 反應(yīng)管中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊。
11. 不同批號的試劑請勿混用,請在有效期內(nèi)使用試劑盒。
 【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司

【】   
【】
【電子郵件】 Service@jianlun.com  Jim@jianlun.com
【騰訊 】 712628581 712628582
【公司】 www.jianlun.com 
【營銷中心】 廣州市中山大道中358號東溪大廈B座511室
【公司地址】 廣州市天河區(qū)車陂第十五工業(yè)園一幢4067室 

 

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