減蛋綜合癥EDS76抗體檢測試劑盒
雞產(chǎn)蛋下降綜合癥抗體ELISA檢測試劑盒
使用說明書
臨床意義
· 雞產(chǎn)蛋下降綜合癥（Egg Drop Synedrome EDS76）是由禽腺病毒引起的一種雞的傳染病。本病在臨床上不表現(xiàn)明顯癥狀，產(chǎn)蛋率急劇下降，以產(chǎn)蛋變色、軟皮蛋、無殼蛋、薄殼蛋和異常蛋為特征，雞感染后體內(nèi)會產(chǎn)生特異性抗體。檢測特異性抗體可作為該病疫苗免疫狀況及輔助診斷指標(biāo)。
· 本試劑盒采用EDS76抗原作固相抗原檢測雞血清中的特異性抗體。本試劑靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。
試劑組成
1.預(yù)包被板48T/96T; 6.*（5號液）1支;
2.酶結(jié)合物（1號液）1支; 7. 終止液（6號液）1支;
3.洗滌液（2號液）1支; 8. 陽性對照品1支;
4.底物（3號液）1支; 9. 陰性對照品1支;
5.顯色劑（4號液）1支; 10.使用說明書1份;
操作程序
1.樣本稀釋：用*（5號液）將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清＋500ul*，充分混勻。陰、陽對照不用稀釋。
2.加樣反應(yīng)：樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔，取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對照孔僅加入100ul*（5號液）。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號液）一滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
3.加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
4.顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）一滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍色會變?yōu)辄S色）。
結(jié)果判斷
1.肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2.儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。
注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。
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