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更新時(shí)間:2017-02-12 02:40:55瀏覽次數(shù):450次
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純化至多100 µg轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)?;蚩滤官|(zhì)粒DNA
質(zhì)粒中提試劑盒
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簡(jiǎn)介:
純化至多100 µg轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)?;蚩滤官|(zhì)粒DNA
1.純化得到相當(dāng)于2次CsCl梯度離心得到的DNA純度
2.高產(chǎn)量質(zhì)粒DNA
3.經(jīng)濟(jì)的制備方法
4.使用LyseBlue,獲得*的裂解效果和zui大的DNA產(chǎn)量
QIAGEN Plasmid Kits通過重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多100 μg質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。
詳細(xì)信息:
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100陰離子交換柱高效純化質(zhì)粒DNA。只需25–100 ml培養(yǎng)基,即可純化獲得多達(dá)100 µg的高拷貝質(zhì)粒DNA。(培養(yǎng)容量取決于質(zhì)??截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:轉(zhuǎn)染、克隆、測(cè)序和體外轉(zhuǎn)錄。
原理
QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。它*的分離特性,使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免使用*、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,細(xì)菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,通過離心收集。
應(yīng)用
QIAGEN Plasmid Kits純化得到的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:
1.轉(zhuǎn)染
2.克隆
3.PCR
4.體外轉(zhuǎn)錄
技術(shù)參數(shù):
特點(diǎn) | 參數(shù) |
---|---|
Applications | Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
Culture volume/starting material | 25–100 ml culture volume |
Plasmid type | High-copy, low-copy, cosmid DNA |
Processing | Manual (centrifugation) |
Samples per run; throughput | 1 sample per run |
Technology | Anion-exchange technology |
Time per run or prep per run | 150 min |
Yield | <100 µg |
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