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閱讀：53發(fā)布時間：2023-6-4
酶底物法是近些年來興起的水中菌群檢測方法，操作簡便，結(jié)果易判斷，適用于快速檢測。但有不少用戶對此種方法存在懷疑，不知道這種方法出來的檢測結(jié)果是否科學(xué)準(zhǔn)確，下面西安海研生物就用酶底物法程控定量封口機(jī)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測對比。
1、材料與試劑
海研生物定量盤、lmL移液管或移液槍、10mL移液管或移液槍、培養(yǎng)箱(35±1)、6瓦366FIITI紫外燈、紫外燈箱(23cmx30onx17on1)、無菌水。
2、、方法步驟
(1)首先向100mL裝有固體培養(yǎng)基的瓶中加入無菌水至刻度，搖勻，制成液體培養(yǎng)基，然后放置在冰箱中保存，使用有效期為5天。見圖1。
(2)取1mL水樣及9mL液體培養(yǎng)基倒入立科定量盤中。見圖2。
(3)將定量盤蓋好，在水平桌面上旋動將所有水樣分配到定量盤的孔中(孔中的氣泡不會影響結(jié)果)。見圖3。
(4)將定量盤豎起呈垂直90度，將多余的水樣由盤內(nèi)海綿吸收。見圖4。
(5)將定量盤緩慢翻轉(zhuǎn)過來，于培養(yǎng)箱中(35±0.5)培養(yǎng)48h(若結(jié)果為可疑陽性則延長培養(yǎng)時間至72h)。見圖5。
(6)計(jì)數(shù)：培養(yǎng)完成后將培養(yǎng)盤蓋打開，用紫外燈在定量盤上方13on處照射，數(shù)顯熒光的孔數(shù)。對照MPN表得出結(jié)果。注意：海綿條顯熒光不必記錄在讀數(shù)范圍內(nèi)。由于本方法的檢測上限為738MPN/mL，如需稀釋時，將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即為報告讀數(shù)(如稀釋l0倍時的操作為：加入0.1mL樣品和9.9mL液體培養(yǎng)基)。
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