來自斯克里普斯研究所的科學家們發(fā)現了一種驚人簡單及安全的破壞細胞內特異基因的新方法?？茖W家們證實其可作為實驗性基因治療一種更安全的替代用于對抗HIV感染，由此顯示了這一新技術的醫(yī)療潛力。相關論文發(fā)表在7月1日的《自然方法》（Nature Methods）雜志上。

對抗HIV的新策略

接下來，研究小組顯示了這一新技術如何能夠用于基于ZFN的策略對抗HIV感染。
艾滋病致病逆轉錄病毒通常通過一種稱為CCR5的T細胞表面受體感染T細胞，清除這種受體可使T細胞高度抵抗HIV感染。2006年，柏林的一位HIV患者在接受骨髓移植治療白血病后不久失去了所有的感染跡象。提供骨髓移植的供體具有一種CCR5基因變異，使得CCR5受體低表達。用基于ZFN的治療破壞T細胞中的CCR5基因或許能夠重現這一戲劇性的效應。

“我們的想法是保護一些患者的T細胞不受HIV感染，使免疫系統(tǒng)仍能強有力地zui終清除感染，”Barbas說。
一種利用ZFNs破壞T細胞中CCR5基因，并將修飾T細胞注入患者體內的基因治療當前正在開展臨床試驗。Barbas和他的研究小組證實利用他們更為簡單的ZFN傳遞方法可以獲得同樣的效應。他們將ZFN蛋白直接添加到細胞皿中的人類T細胞上，發(fā)現在數小時內相當一部分的ZFN治療細胞顯示出CCR5基因活性急劇減少。

Barbas說在數次應用ZFNs后，借助一種特殊的冷卻方法來提高蛋白質穿過細胞膜的能力，科學家們能夠以接近基因治療方法的效率失活CCR5基因。
新方法似乎也更安全。研究小組用于參照的一種基于DNA的方法和其他曾在文獻中報道的基于病毒的方法可持續(xù)數天生成ZFNs，會造成大量脫靶DNA損傷。而直接傳遞ZFN蛋白質保留了細胞內完整性，且只有幾個小時，造成極小的脫靶損傷。

“在一些脫靶位點基因治療方法往往會造成損傷，我們沒有看到來自這一新技術的任何損害，”Barbas說。

健康“小工廠”的希望

研究小組用各種其他類型的細胞測試了直接的ZFN傳遞技術，發(fā)現它在人類皮膚“成纖維”細胞中以特別高的效率發(fā)揮作用。研究人員現在正研究先進的療法，從患者處獲取那樣的成纖維細胞，重編程細胞的基因表達模式使它們有效轉變?yōu)楦杉毎＿@些誘導干細胞隨后可以利用ZFNs和其他基因組編輯技術進行修飾。當注入到患者體內，它們能夠在長時期內生成數百萬的治療后代細胞。
這種技術有朝一日或可用于治療各種各樣的疾病。Barbas在十多年時間內一直從事抗CCR5策略開發(fā)，他希望開始利用基于ZFN的治療破壞造血干細胞中的CCR5基因。將這些造血干細胞輸入到HIV患者體內，成為生成抗HIV T細胞的小工廠。

“即便是少量干細胞攜帶這種抗HIV特性，也可能zui終*替代患者原始的易受攻擊的T細胞群，”他說。

來源：生物通