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上海繼錦化學科技有限公司
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人激肽釋放酶1(KLK 1)ELISA試劑盒說明書

時間:2013/3/27閱讀:814
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷
人(Human)激肽釋放酶1(KLK 1)ELISA檢測試劑盒使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預
先包被激肽釋放酶1(KLK 1)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標
準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,
TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終
的黃色。顏色的深淺和樣品中的激肽釋放酶1(KLK 1)呈正相關。用
酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞
刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地
分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘
取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶*溶解
后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明7. 每孔加入終止液50μL,15min 內(nèi),在450nm 波長處測定各孔的
OD 值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應
OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣
本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R 值,大于等于
0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所
產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者
承擔。

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