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有助于微生物分離鑒定的新設(shè)備
在世界上有數(shù)百萬種微生物,但是,絕大多數(shù)微生物無法在實驗室準備的人工介質(zhì)上生長,因此,到目前為止只有其中少數(shù)被鑒定。人們首先意識到這個問題是在一個世紀前,從環(huán)境樣品中的直接細菌計數(shù)與產(chǎn)生的菌落形成單位(CFUs)數(shù)目并不相關(guān),被稱為“偉大的平板,計的數(shù)太偏”的一個現(xiàn)象,是對環(huán)境中微生物實際數(shù)量通平板菌落計數(shù)之間巨大差異的描述。
問題不僅是,極少菌落生長在平板上,而且當與環(huán)境樣本的直接單細胞分析相比時,只有少數(shù)物種形成菌落。免培養(yǎng)方法,如rRNA基因測序,發(fā)現(xiàn)大自然中仍然有巨大數(shù)量的未培養(yǎng)微生物物種。因此,微生物世界的巨大復(fù)雜性,在很大程度上仍未開發(fā)和不被了解。
自那時以來,有很多研究試圖克服微生物培養(yǎng)中的這些局限性。一些研究對常規(guī)方法進行改進,如改變介質(zhì)組成(或濃度)、交聯(lián)劑和培養(yǎng)時間。另一種方法是使用膜結(jié)合設(shè)備,在微生物的自然環(huán)境中孵化微生物細胞。一些研究表明,這種方法可讓必要的生長因子從自然生境供應(yīng)到設(shè)備中,從而激活未培養(yǎng)微生物的生長。
由于未開發(fā)物種的數(shù)量龐大,高通量也是培育方法的一個重要方面。這通常是由生長隔室的小型化實現(xiàn)。一個例子是凝膠微滴技術(shù),可進行高通量培養(yǎng),也可用于高通量篩選。在這方面,微密加工技術(shù)具有*改革微生物培養(yǎng)的潛力。其中一個例子是,小型化培養(yǎng)芯片,在一個單一設(shè)備上有一百萬個微觀尺度的生長隔室。
盡管已經(jīng)取得了這些進步,對于增加培養(yǎng)物種的數(shù)量而言,培養(yǎng)技術(shù)的進一步創(chuàng)新仍然是至關(guān)重要的。這些進展將闡明許多疾病的潛在因素,帶來新藥的開發(fā),揭示微生物世界缺失的碎片。
從廣義上講,微生物純培養(yǎng)主要需要以下三個步驟:①從其他微生物細胞中分離個體細胞,②將單個細胞接種到培養(yǎng)基上,③孵育,讓細胞增殖,隨后進行生物檢測和收集。zui近,美國東北大學的工程師Edgar Goluch和生物學家Slava Epstein,開發(fā)出一種微型和納米制備的設(shè)備,可讓上述三個步驟自動執(zhí)行。用來從物種混合物中捕獲單個細菌細胞,產(chǎn)生這些細胞的純培養(yǎng)。
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