白血病相關(guān)新基因抗體相關(guān)信息

佐劑 （adjuvant） 
*一般可溶性抗原注射后，迅速?gòu)淖⑸洳课粩U(kuò)散、吸收代謝。佐劑可延長(zhǎng)潴留時(shí)間，且延長(zhǎng)免疫刺激作用。因此在制備抗體的過(guò)程中，常將抗原和佐劑一起注射。 
*zui常用的佐劑是弗氏佐劑，又分為: 
-弗氏不*佐劑（Freund's incomplete adjuvant） 
-弗氏*佐劑（Freund's complete adjuvant） 
弗氏不*佐劑 
（Freund's incomplete adjuvant, FIA） 
*是由油劑（石蠟油或植物油）與乳化劑（羊毛脂或Tween80）混合而成，比例為1:1、2:1、3:1或5:1，可根據(jù)需要而定，通常2:1。 
*使用時(shí)與水溶性抗原按1:1比例充分混合，使抗原分散在佐劑中形成油包水乳劑。 
弗氏*佐劑 （Freund's complete adjuvant, FCA） 
*在弗氏不*佐劑中加入活卡介苗或死的結(jié)核分枝桿菌（終濃度為2～20mg/ml），即成為FCA。 
*免疫動(dòng)物時(shí)，將弗氏佐劑與抗原按體積 1:1 混合乳化后（油包水）注入動(dòng)物。 
-一般注射時(shí)用*佐劑乳化，第二次或第三次注射時(shí)用不*佐劑或不用佐劑。 
佐劑與抗原乳化的方法 
*研磨法：適于制備大量的佐劑抗原 
-先將不*佐劑加熱，取1.73ml放人無(wú)菌玻璃研缽內(nèi)；緩緩滴入0.23ml活卡介苗，邊滴邊按同一方向研磨，使菌體*分散。 
-按同樣方法滴人抗原，每加一滴應(yīng)研磨至小滴消失。滴加抗原的速度要慢，待抗原全部加人后，應(yīng)成為乳白色粘稠的油包水乳劑。 
*缺點(diǎn)：研缽壁上粘附大量乳劑，抗原損失較大，對(duì)微量或難得抗原不宜采用。 
佐劑與抗原乳化的方法（續(xù)） 
*注射器混合法  白血病相關(guān)新基因抗體相關(guān)信息 
-將等量的*佐劑和抗原分別吸人兩個(gè)5ml注射器內(nèi)，然后插入三通管內(nèi)，交替推動(dòng)針管混勻，往復(fù)操作直至形成粘稠的乳劑為止。 
*優(yōu)點(diǎn)：無(wú)菌操作，節(jié)省抗原或佐劑。 
*缺點(diǎn)：不易乳化，時(shí)間長(zhǎng)。 
佐劑與抗原乳化的方法（續(xù)） 
*快速乳化法：利用超聲波粉碎器可快速乳化抗原和佐劑混合物。 
-將抗原和佐劑按所需量加入一離心管中，置于超聲波粉碎器上，粉碎頭浸入液面下 0.5cm，離瓶底0.5cm左右，以免打碎離心管。 
-每次乳化 10～15s，然后置冰箱lmin左右。反復(fù)乳化3～4次即可*乳化。管內(nèi)殘余量800r/min離心5～10min收集。 
*優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單、快速、節(jié)省材料。 
乳化劑的鑒定 
*判斷乳化是否充分，可將一滴乳化好的液體滴在水面上（冷水中），如能長(zhǎng)時(shí)間保持圓珠形而不散開(kāi)，表示乳化達(dá)到要求。