治療性單抗研究進(jìn)展與抗體產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)
抗體作為機(jī)體免疫應(yīng)答的通用試劑，能夠識(shí)別、中和或清除誘發(fā)疾病的抗原。抗體的"可變區(qū)"（Fab）可特異性的結(jié)合抗原或靶細(xì)胞；抗體的"恒定區(qū)"（Fc）介導(dǎo)多種細(xì)胞效應(yīng)功能（CDC、ADCC等）。此外，F(xiàn)c端與FcRn的結(jié)合，使得抗體分子在體內(nèi)的半衰期長(zhǎng)達(dá)十至二十天。以上抗體的分子結(jié)構(gòu)與生物功能保證了其作為治療性蛋的藥用療效。 截止2012年底，歐美市場(chǎng)已有總計(jì)三十余種治療性通用試劑抗體上市銷(xiāo)售。以上抗體藥物已經(jīng)在免疫性疾病[1]、癌癥[2]等治療領(lǐng)域取得巨大成功。而從抗體藥物的研發(fā)線(xiàn)來(lái)看，已經(jīng)有三百余種單抗藥物進(jìn)入臨床研究階段[3]。抗體藥物研制的成功率（20%）遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)小分子化學(xué)藥（11%）[4]。所以，抗體通用試劑藥物已經(jīng)成為，并且未來(lái)仍將是制藥行業(yè)發(fā)展的主要方向[5]。
1.1 抗體技術(shù)的發(fā)展進(jìn)程
抗體在臨床上的治療性應(yīng)用，始于1888年Emile Roux使用"多克隆抗體"治愈白喉病患者。1897年P(guān)aul Ehrlich's 提出了假說(shuō)：即利用抗體進(jìn)行"靶向治療"。利用抗原免疫動(dòng)物可以快速獲得含有多克隆抗體的"抗血清"。但是由于多克隆抗體本質(zhì)上是針對(duì)抗原不同表位的單克隆抗體混合物，其質(zhì)量并不均一，加之受免疫動(dòng)物的制備路線(xiàn)所限，多克隆抗體在臨床上的應(yīng)用并不多見(jiàn)；上世紀(jì)七十年代，利用小鼠B淋巴雜交瘤細(xì)胞，可以獲得抗單個(gè)抗原決定簇的"單克隆抗體"，后者較多克隆抗體特異性高、均一性好，成本低廉，為抗體技術(shù)的臨床應(yīng)用帶來(lái)突破[6]。
上世紀(jì)八十年代，美國(guó)Gentech公司申請(qǐng)了關(guān)于"重組抗體"制備的*（"Cabilly patent"），即利用DNA重組技術(shù)，將抗體重鏈、輕鏈DNA同時(shí)導(dǎo)入宿主細(xì)胞，后者合成并分泌具有生物活性的單克隆抗體。此后，治療性抗體的生產(chǎn)真正進(jìn)入到產(chǎn)業(yè)化階段。另外，基因工程抗體能夠在基因水平對(duì)抗體分子進(jìn)行切割、拼接，組裝，賦予抗體分子新的生物活性，較"多克隆抗體""雜交瘤單抗"更具應(yīng)用前景。
1.2抗體藥物的發(fā)展進(jìn)程
1986年，采用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的"鼠源單抗"OKT3TM（muromonab）成為上市的*治療性單抗。但是，由于鼠源單抗嚴(yán)重的免疫原性（人抗鼠抗）問(wèn)題。抗體藥物在上市的*十年間臨床應(yīng)用并不廣泛。 此后，"嵌合抗體"技術(shù)保留鼠源Fab，采用人源Fc段替代鼠源Fc端，部分減輕了鼠源抗體的免疫原性。 "CDR移植技術(shù)"又可將可變區(qū)的部分序列更換為人源序列，進(jìn)一步的減輕嵌合抗體的免疫原性，采用此技術(shù)的抗體藥物稱(chēng)之為"人源化抗體"（humanized antibody）。由于成功的降低了重組抗體的免疫原性，上世紀(jì)九十年代末上市的諸多嵌合抗體和人源化抗體，得以在臨床上廣泛應(yīng)用。
"嵌合抗體"的人源程度可達(dá)66%，"人源化抗體"可達(dá)90-95%，但仍不是真正意義上的"人源抗體"。上世紀(jì)八十年代發(fā)展起來(lái)的"體外展示技術(shù)"（噬菌體、酵母菌、核糖體展示等），通過(guò)構(gòu)建大容量人源抗體文庫(kù)，可實(shí)現(xiàn)全人源抗體的體外篩選[7]（如2002年上市Adalimumab）。本世紀(jì)初興起的的"轉(zhuǎn)基因鼠"技術(shù)（如：HuMAb-MouseTM、KM-MouseTM、XenoMouseTM、VelocImmuneTM、等），在小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)入了人的抗體基因簇，經(jīng)抗原免疫后也產(chǎn)生全人源抗體[8]（如2006年上市的Panitumumab）。此外，近年來(lái)出現(xiàn)"兔單抗"技術(shù)（如RabMAbTM），較傳統(tǒng)鼠源抗體親和力強(qiáng)、特異性高，也是成為抗體藥物設(shè)計(jì)的一種選擇[9]。從目前以上市抗體的結(jié)構(gòu)分析，人源化抗體及全人源抗體已經(jīng)成為抗體藥物的主流[10]
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