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技術(shù)文章

大鼠磷酸化蛋白激酶C實(shí)驗(yàn)原理

閱讀:448發(fā)布時(shí)間:2012-5-22

 實(shí)驗(yàn)原理:

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)水平。用純化的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化蛋白激酶C(P-PKC),再與HRP標(biāo)記的磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)濃度。


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