1．動(dòng)物的選擇 純種BALB／C小鼠較溫順，離窩的活動(dòng)范圍小，體弱，食量及排污較小，一般環(huán)境潔凈的實(shí)驗(yàn)室均能飼養(yǎng)成活。目前開展雜交瘤技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室多選用純種BALB／C小鼠。
2．免疫方案 免疫方案應(yīng)根據(jù)抗原的特性不同而定，選擇合適的免疫方案對(duì)細(xì)胞融合雜交的成功，并獲得高質(zhì)量的McAb至關(guān)重要。一般在融合前兩個(gè)月左右根據(jù)確立免疫方案開始初次免疫。對(duì)抗原的要求是純度越高越好，尤其是對(duì)于初次免疫所用的抗原。如為細(xì)胞抗原，可取1．0X107個(gè)細(xì)胞作腹腔免疫?？扇苄钥乖杓?福氏佐劑并經(jīng)充分乳化。如為聚丙烯酰胺電泳純化的抗原，可將抗原所在的電泳條帶切下，研磨后直接用于動(dòng)物免疫。
免疫過(guò)程和方法與多克隆抗血清制備基本相同，因動(dòng)物、抗原形式、免疫途徑不同而異，以獲得價(jià)抗體為zui終目的。免疫間隔一般2—3周。一般被免疫動(dòng)物的血清抗體效價(jià)越高，融合后細(xì)胞產(chǎn)生價(jià)特異抗體的可能性越大，而且單克隆抗體的質(zhì)量（如抗體的濃度和親和力）也與免疫過(guò)程中小鼠血清抗體的效價(jià)和親和力密切相關(guān)。末次免疫后3～4d，可分離脾細(xì)胞融合。

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