亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海金穗生物科技有限公司

制備用于抗原上選擇的噬菌體抗體

時(shí)間:2012-12-26閱讀:372
分享:

轉(zhuǎn)化后,就得到了菌苔形式的抗體文庫??梢灾苽涑筛视蛢?chǔ)存物保存于一80℃。這是一個(gè)原始文庫,象征著具有*價(jià)值的資源。的抗體文庫也是由這種原始文庫制備而來的。然而,當(dāng)用大培養(yǎng)板鋪板擴(kuò)增原始文庫時(shí),會(huì)造成部分多樣性的丟失。因此在任何噬菌體制備或細(xì)菌擴(kuò)增步驟中,接種量必須總是大于5倍的文庫容量,從而保持文庫的多樣性。

在大多數(shù)噬菌體展示載體中,抗體片段的表達(dá)是由lacZ啟動(dòng)子啟動(dòng)的。盡管這個(gè)啟動(dòng)子存在某些漏洞并可以優(yōu)化,但以以下一些指導(dǎo)進(jìn)行操作,其效果依然良好。在噬菌體救援前,含有抗體文庫的細(xì)菌在葡萄糖存在的條件下,可生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期。葡萄糖可抑制lacZ啟動(dòng)子的活性,因此使pⅢ和抗體表達(dá)都下降。這就有兩點(diǎn)重要作用:一是由于pⅢ和抗體產(chǎn)生的毒性下降,防止了文庫的偏性發(fā)生;二是抑制了pⅢ表達(dá)就可允許細(xì)菌纖毛表達(dá),從而使輔助噬菌體能進(jìn)行感染。如果沒有葡萄糖,感染效率會(huì)急劇下降,結(jié)果大大降低了抗體文庫的有效容量:輔助噬菌體感染后,則須去除葡萄糖,以便讓pⅢ和抗體進(jìn)行表達(dá)。而后,低水平lacZ啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)pⅢ表達(dá),但這已足以進(jìn)行有效的展示了。用異丙基硫代半乳糖苷(1PTG)誘導(dǎo)啟動(dòng)子達(dá)不到預(yù)期效果,反而大大降低了展示水平。這是由pⅢ和抗體融合蛋白的毒性及pⅢ抗體融合蛋白的降解所致。對(duì)于scFv文庫和Fab文庫,過夜生長(zhǎng)階段的典型溫度是30℃;此溫度下,抗體展示水平似乎更佳。選擇前,先用PEG沉淀法從培養(yǎng)基上清中制備噬菌體。這樣就可以去除不*抑制或蛋白水解切除所產(chǎn)生的抗體片段。這些抗體片段能與噬菌體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。PEG沉淀也可以去除其他任何能干擾選擇的污染物。如果計(jì)劃長(zhǎng)期保存噬菌體,推薦接著進(jìn)行氯化銫離心純化。
 

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

在線留言
精品久久久久中文字幕人| 色橹橹欧美在线观看视频高清免费| 精品的极品美女一区二区三区| 欧美大鸡巴操大骚逼| 天天爽夜夜爽夜夜爽一区| 无码成人一区二区| 美女嫩逼插进大屌| 国产精品视频美熟女一区二区| 嗯嗯嗯啊啊啊好湿好痒好多水视频| 日韩精品一区二区天堂| 久久国产高清波多野结衣| 久久国产亚洲高清| 亚洲欧洲日本精品| 亚洲精品伦理熟女国产| 青娱乐欧美性爱视频| 美女人的逼免费观看| 女女同性女同1区二区三| 美女爽的嗷嗷叫免费| 美女插逼插出淫水来| 最新中文字幕av不卡高清| 亚洲高清中文字幕一区二区三区| 黑人大鸡巴日小逼| 日韩 欧美 一区 二区三区| 大鸡插骚货人人色| 欧美亚洲综合久久夜夜嗨| 久久无码免费视频| 日本一二区视频在线观看| 色婷婷五月综合久久| 黄色三极片在线观看| 插女人下面高潮视频| 欧美大鸡巴爆草美女| 中文字幕一高清免费视频| 91久久高清国语自产拍| 中国美女操逼的视频| 大鸡巴猛插小穴视频| 亚洲精品成人无码app| 国产欧美洲中文字幕床上| 精品v欧洲高清欧美| 精品久久久久久不卡亚洲| 亚洲欧洲精品无码久久久| 被公侵犯中文字幕在线观看|