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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒生物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血實(shí)用技術(shù)

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采血方法的選擇,決定于實(shí)驗(yàn)的目的所需血量以及動(dòng)物種類。凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白的測(cè)定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時(shí)可作靜脈采血。靜脈采血時(shí),若需反復(fù)多次,應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開(kāi)始,以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。例如,研究毒物對(duì)肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂,需要比較動(dòng)、動(dòng)脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及 K+、Na+、CI-離子濃度,必須采取動(dòng)脈血液。 采血時(shí)要注意:⑴采血場(chǎng)所有充足的光線;室溫夏季保持在25-28℃,冬季,15-20℃為宜;⑵采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒;⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑.
不同動(dòng)物采血部位與采血量的關(guān)系
采血量 采血部位 動(dòng)物品種 動(dòng)物品種 zui大安全采血量(ml) zui小致死采血量(ml)
小 鼠 0.2 0.3
大 鼠 1 2
豚 鼠 5 10
兔 10 40
狼 狗 100 500
獵 狗 50 200
猴 15 60
 
取少量血 尾靜脈 耳靜脈 眼底靜脈叢 舌下靜脈 腹壁靜脈 冠、腳蹼皮下靜脈 大鼠、小鼠 兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊 兔、大鼠、小鼠 兔 青蛙、蟾蜍 雞、鴨、鵝
取中量血 后肢外側(cè)皮下小隱靜脈前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈 耳動(dòng)脈 頸靜脈 心臟 斷頭 翼下靜脈 頸動(dòng)脈 狗、猴、貓 狗、猴、貓 兔 狗、貓、兔 豚鼠、大鼠、小鼠 大鼠、小鼠 雞、鴨、鴿、鵝 雞、鴨、鴿、鵝
取大量血 股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈 心臟 頸靜脈 摘眼球 狗、猴、貓、兔 狗、猴、貓、兔 馬、牛、山羊、綿羊 大鼠、小鼠

(一)小鼠、大鼠采血法
1.割(剪)尾采血 當(dāng)所需血量很少時(shí)采用本法。固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的溫水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈。再將尾擦干,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結(jié)束,傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口,割破尾動(dòng)脈或靜脈,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多時(shí)(僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查),可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7號(hào)或8號(hào)注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時(shí)即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果反復(fù)取血,應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿刺。
3.眼眶靜脈叢采血 采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部(大鼠采血需帶上紗手套),應(yīng)防止動(dòng)物窒息。當(dāng)取血時(shí)左手拇指及食指輕輕壓迫動(dòng)物的頸部?jī)蓚?cè),使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號(hào)針頭的1ml注射器或長(zhǎng)頸(3~4cm)硬質(zhì)玻璃滴管(毛細(xì)管內(nèi)徑0.5-1.0mm),使與鼠面成45℃的夾角,由眼內(nèi)角刺入,針頭斜面先向眼球,刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對(duì)著眼眶后界。刺入濃度,小鼠約2~3mm,大鼠約4~5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn),同時(shí),將針退出約0.1-0.5mm,邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細(xì)管中,當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?,即除去加于頸部的壓力,同時(shí),將拔出,以防止術(shù)后穿刺孔出血。 若技術(shù)熟練,用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血均無(wú)多大困難。左右兩眼輪換更好。體重20-25g的小鼠每次可采血 0.2-0.3ml;體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可適用于某些生物化學(xué)項(xiàng)目的檢驗(yàn)。
4.斷頭取血 采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大(?。┦蟮念i部皮膚,并作動(dòng)物頭朝下傾的姿勢(shì)。右手用剪刀猛剪鼠頸,約1/2-4/5的頸部前剪斷,讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0.8~1.2ml;大鼠約5-10ml。
5.心臟采血 鼠類的心臟較小,且心率較快,心臟采血比較困難,故少用?;铙w采血方法與豚鼠相同。若做開(kāi)胸一次死亡采血,先將動(dòng)物作深麻醉,打開(kāi)胸腔,暴露心臟,用針頭刺入右心室,吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml;大鼠約0.8-1.2ml。
6.頸動(dòng)靜脈采血 先將動(dòng)物仰位固定,切開(kāi)頸部皮膚,分離皮下結(jié)締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動(dòng)脈,離心端結(jié)扎,向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。
7.腹主動(dòng)脈采血 先將動(dòng)物麻醉,仰臥固定在手術(shù)架上,從腹正中線皮膚切開(kāi)腹腔,使腹主動(dòng)脈清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血?;蛴脽o(wú)齒鑷子剝離結(jié)締組織,夾住動(dòng)脈近心端,用尖頭刀,剪斷動(dòng)脈,使血液噴入盛器。
8.股動(dòng)(靜)脈采血 先由助手握住動(dòng)物,采血者左手拉直動(dòng)物下肢,使靜脈充盈?;蛘咭圆珓?dòng)為指標(biāo),右手用注射器刺入血管。體重15-20g 小鼠采血約0.2-0.8ml,大鼠約0.4-0.6ml。

(二)豚鼠采血法
1.耳緣剪口采血 將耳消毒后,用銳器(刀或刀片)割破耳緣,在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液,阻止血凝,則血可自切口自動(dòng)流出,進(jìn)入盛器。操作時(shí),使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。
2.心臟采血 取血前應(yīng)探明心臟搏動(dòng)zui強(qiáng)部位,通常在胸骨左緣的正中,選心跳zui顯的部位作穿刺。針頭宜稍細(xì)長(zhǎng)些,以免發(fā)生手術(shù)后穿刺孔出血,其操作手法詳見(jiàn)兔心臟采血。因豚鼠身體較小,一般可不必將動(dòng)物固定在解剖臺(tái)上,而可由助手握住前后肢進(jìn)行采血即可。成年豚鼠每周采血應(yīng)不超過(guò)10ml為宜。
3.肌動(dòng)脈采血 將動(dòng)脈仰位固定在上,剪去腹股溝區(qū)的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切開(kāi)長(zhǎng)約2-3cm的皮膚,使股動(dòng)脈暴露及分離。然后,用鑷子提起股動(dòng)脈,遠(yuǎn)端結(jié)扎,近端用夾住,在動(dòng)脈剪一小孔,用無(wú)菌玻璃小導(dǎo)管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放開(kāi),血液即導(dǎo)管口流出。一次可采血10-20ml。
4.背中足靜脈取血 助手固定動(dòng)物,將其右或左右膝關(guān)節(jié)伸直提到術(shù)者面前。術(shù)者將動(dòng)物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿的注射針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復(fù)采血時(shí),兩后肢交替使用。

(三)兔采血法
1.耳靜脈采血 本法為zui常用的取血法之一,常作多次反復(fù)取血用,因此,保護(hù)耳緣靜脈,防止發(fā)生栓塞特別重要。 將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中,或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵,將耳靜脈部位的毛拔去,用75%酒精局部消毒,待干。用手指輕輕摩擦兔耳,使靜脈擴(kuò)張,用連有5(1/2)號(hào)針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血,取血完畢用棉球壓迫止血,此種采血法一次zui多可采血5-10ml。
 

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