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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

心肌成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)

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用Langendorff灌流消化(膠原酶II)只能取得心肌細(xì)胞。建議直接將心臟剪碎,成纖維細(xì)胞我們這里一般采用0.05%消化。無菌條件取出心臟D-hank's液(PBS也可)漂洗,剪碎心臟加入5倍體積消化液,37C水浴3-5min,反復(fù)吹打,靜置,待自然沉降后棄去上清液。剩余沉淀再加入約5倍體積0.08%及0.1%膠原酶II混合液,反復(fù)吹打,大約10分鐘(消化時間往往靠經(jīng)驗的判斷),離心取沉淀重懸于含20%BSA的DMEM(有條件可以用Cascade的培養(yǎng)液)。60-90min后更換培養(yǎng)液(差速貼壁,成纖維細(xì)胞比心肌細(xì)胞貼壁快)。

1、的作用比較強烈,聯(lián)合使用膠原酶將膠原纖維充分消化后利于離心時細(xì)胞沉淀,提高細(xì)胞存活率。另外,消化時間不宜太長,主要憑觀察和經(jīng)驗來判斷。離心采用1000rpm 5min。

2、酶的配置可以用d-Hank's液或生理鹽水都行。血清的作用主要是終止消化,用一般加了血清的DMEM就行,我們這里是20%胎牛血清。

3、貼壁時間:我?guī)熜衷?jīng)告訴我2hr,現(xiàn)在我覺得90min已經(jīng)很好了。

4、細(xì)胞可以先用臺盼藍(lán)測定存活率。

5、鑒定:在倒置顯微鏡下觀察,細(xì)胞呈梭形、多角形,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核大,呈橢圓形,常含有2-3 個核。IHC可以用I抗體(動物抗人B3、抗波形蛋白、抗血管平滑肌肌動蛋白)其余基本按IHC的步驟來

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