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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

細(xì)胞凋亡詳細(xì)介紹

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細(xì)胞程序性死亡是正常生理現(xiàn)象,多發(fā)生于胚胎發(fā)育和維持組織自身平衡。Kerr et al.zui早發(fā)現(xiàn)有兩種細(xì)胞死亡:壞死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis)。Apoptosis,希臘文意思是樹葉從樹上“凋落",這里是指凋亡,是細(xì)胞主動(dòng)參與自身死亡的過程。凋亡程序有一些特殊形態(tài)學(xué)特征,包括質(zhì)膜的改變,如細(xì)胞膜不對(duì)稱性和細(xì)胞附著消失,胞漿和細(xì)胞核固縮,核內(nèi)DNA裂解。到了晚期,凋亡細(xì)胞斷裂成“凋亡小體",并很快被巨噬細(xì)胞清除,而不會(huì)引起周圍細(xì)胞的炎癥損傷。壞死,通常是由細(xì)胞損傷或細(xì)胞毒物作用引起,在形態(tài)學(xué)和細(xì)胞生物特性上,與凋亡有著本質(zhì)的區(qū)別。壞死細(xì)胞的早期變化是細(xì)胞和線粒體腫脹,繼而細(xì)胞膜破壞。不同于凋亡的是,壞死的細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)容物(多為蛋白水解酶)釋放,會(huì)引起周圍組織的炎癥反應(yīng)。病理情況會(huì)引起細(xì)胞異常凋亡,如Alzheimer氏綜合癥、Hodgkin氏綜合癥、移植物抗宿主性疾病、移植排斥、自身免疫性疾病、腫瘤、AIDS等。

隨著對(duì)凋亡機(jī)制的深入了解,越來越多的凋亡檢測(cè)方法得到了發(fā)展和應(yīng)用,應(yīng)根據(jù)細(xì)胞或組織類型、凋亡誘導(dǎo)途徑的不同,選擇*的實(shí)驗(yàn)方法。凋亡zui早的特征變化之一就是出現(xiàn)了一系列蛋白水解酶——Caspase酶?;罨腃aspase酶裂解許多細(xì)胞內(nèi)酶,引發(fā)凋亡細(xì)胞的特征性形態(tài)改變,這一過程的核心是Caspase-3的活化。另一個(gè)凋亡早期的變化是細(xì)胞膜對(duì)稱性消失,包括質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰重新分布,由胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到胞膜外側(cè),而細(xì)胞膜的這種改變可以通過一種與帶負(fù)電荷的磷脂高度親和的蛋白——Annexin V來檢測(cè)。凋亡晚期,另一個(gè)特征變化是核酸內(nèi)切酶活化,將DNA斷裂降解,使用凝膠電泳的方法,可以觀察到DNA斷裂片段形成的“l(fā)adder"現(xiàn)象。這種凋亡細(xì)胞的DNA斷裂碎片,也可以通過在DNA片段末端摻入熒光標(biāo)記物的方法,在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測(cè)此種凋亡改變,如APO-BRDU、APO-DIRECT試驗(yàn)就是這種方法。近年來,還發(fā)展了RiboQuant RNase Protection Assay,可以對(duì)許多凋亡相關(guān)基因進(jìn)行詳細(xì)的分析,將凋亡過程的研究帶入了mRNA水平。

細(xì)胞凋亡檢測(cè)的常用手段主要分為形態(tài)學(xué)檢查、分子生物學(xué)方法、免疫電泳法和細(xì)胞學(xué)檢查。其中,用流式細(xì)胞術(shù)研究細(xì)胞凋亡在技術(shù)和應(yīng)用領(lǐng)域方面應(yīng)用日益廣泛。由于可以對(duì)凋亡的多種特征進(jìn)行快速、靈敏、特異的定性分析和定量分析,流式細(xì)胞術(shù)已經(jīng)成為凋亡分析的重要檢測(cè)手段。

PharMingen公司提供了許多從多種角度研究凋亡的試劑系統(tǒng),包括小鼠、大鼠和人類蛋白抗體:Fas和Fas配體、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信號(hào)蛋白;再有,提供了多種流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒,包括:Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit;另外,還提供了mRNA分析試劑——RiboQuant Rnase Protection Assay系統(tǒng),為小鼠、大鼠和人類的凋亡相關(guān)基因分析提供了多探針模板。

死亡信號(hào)的受體和配體

Fas配體(FasL)和TRAIL(Apo-2L)屬于介導(dǎo)宿主防御和免疫反應(yīng)的TNF超級(jí)家族。FasL和受體Fas結(jié)合,或TRAIL和受體結(jié)合,可以引發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)途徑,引起細(xì)胞凋亡。Fas/FasL系統(tǒng)在T細(xì)胞發(fā)育,消除自反應(yīng)T細(xì)胞克隆,以及其他的負(fù)選擇時(shí),發(fā)揮了作用;而TRAIL介導(dǎo)途徑主要影響轉(zhuǎn)錄因子、NF-kB及Caspase家族半水解酶的活化。另外,還發(fā)現(xiàn)一些TRAIL受體即可以激活TRAIL信號(hào)途徑,如DR3、DR4、DR5,也可以充當(dāng)“誘騙"受體,即所謂的DcRs,如DcR1、DcR2。

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