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技術文章
干粉培養(yǎng)基的配制
點擊次數(shù):310 發(fā)布時間:2012-11-5
干粉培養(yǎng)基的配制
注意事項
1.認真閱讀說明書。說明書都注明干粉不包含的成分,常見的有NaHCO3、*、丙酮酸鈉、HEPES等。這些成分有些是必須添加的,如NaHCO3、*,有些根據(jù)實驗需要決定。
2.配制是要保證充分溶解,NaHCO3、*等物質都要等培養(yǎng)基*溶解之后才能添加。
3.配制所用的水應是三蒸水,離子濃度很低。
4.所用器皿應嚴格消毒。
5.配制好的培養(yǎng)基應馬上過濾,無菌保存于4度。
6.液體培養(yǎng)基主要是為了科研工作的方便而設計的培養(yǎng)基,它是一種滅菌后保證無菌的溶液,必要時可制成無內毒素等的溶液,可節(jié)省科研人員的工作量。
配制方法
1.在一個盡可能接近總體積的容器中加入比預期培養(yǎng)基總體積少5%的雙蒸水。
2.在室溫(20℃到30℃)的水中加入干粉培養(yǎng)基,輕輕攪拌,不要加熱。
3.水洗包裝袋的內部,轉移全部的痕量干粉到容器內。
4.加NaHCO3到培養(yǎng)基中。
5.用雙蒸水稀釋到想要的體積,攪拌溶解。注意不要過分攪拌。
6.通過緩慢攪拌加入1N NaOH 或1N HCL調節(jié)pH值,由于pH值在過濾時會上升0.1到0.3,因而調節(jié)pH值使它比zui終想要的pH值低0.2到0.3。培養(yǎng)基在過濾前要保持密封。