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上海隆壘生物科技有限公司

MTT溶液的配制方法

時(shí)間：2013-10-12閱讀：845
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MTT溶液的配制方法
 

通常，此法中的MTT 濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無(wú)酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22μm濾膜過(guò)濾以除去溶液里的細(xì)菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的過(guò)程中，容器用鋁箔紙包住。

 
需要注意的是，MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力，但不能測(cè)定細(xì)胞數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT 吸光度在0-0.7 范圍內(nèi)。
 
MTT一般現(xiàn)用現(xiàn)配，過(guò)濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20度長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時(shí)候現(xiàn)配，直接往培養(yǎng)板中加，沒(méi)必要一下子配那么多,尤其當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時(shí)就不能再用了。
 
MTT有致癌性，用的時(shí)候小心,有條件帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無(wú)菌，MTT對(duì)菌很敏感;往96孔板加時(shí)不避光也沒(méi)有關(guān)系，畢竟時(shí)間較短，或者你不放心的時(shí)候可以把操作臺(tái)上的照明燈關(guān)掉.
 
配制MTT時(shí)用用PBS溶解,也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。
 
PBS配方：
 
Nacl 8g
 
Kcl 0.2g
 
Na2HPO4 1.44g
 
KH2PO4 0.24g
 
調(diào)pH 7.4
 
定容1L
 

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