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阿利新藍(lán) PAS 染色液說明書
阿利新藍(lán) PAS 染色液【原理及作用】
阿利新藍(lán)和 PAS 技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種 技術(shù)也常用作廣泛檢測黏蛋白的手段。該技術(shù)染色陰性,可明確斷定該物質(zhì)不是黏蛋白。
在大多數(shù)方法中,切片先經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)的阿利新藍(lán)(pH 值為 2.5)染色,再使用 PAS 技術(shù),阿利 新藍(lán)可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍(lán)色。PAS 技術(shù)可將中性黏蛋白染成深紅/ 紅紫色,同時將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細(xì)胞染成深淺不同的紫色,這是由 于阿利新藍(lán)與 Schiff 試劑結(jié)合并反應(yīng)。上述染色常可出現(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白 的小腸杯狀細(xì)胞中。
阿利新藍(lán) PAS 染色液【參考操作步驟】
1、二甲苯脫蠟,梯度酒精入至去離子水再水化。
2、試劑(A)染 30min。
3、流水沖洗 5 min,去離子水快速沖洗。
4、試劑(B)氧化染 5min。
5、流水沖洗 5 min。
6、試劑(C)15min。
7、流水沖洗 10min。
8、試劑(D)淡染細(xì)胞核。
9、流水沖洗 5-10min,適當(dāng)返藍(lán)。
10、流水沖洗 5min。
11、梯度酒精脫水,二甲苯透明,混合封片劑封片。
【結(jié)果】
糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白紅紫色 酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)藍(lán)色 蛋白多糖和透明質(zhì)酸藍(lán)色
含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細(xì)胞或組織可染成不同程度的藍(lán)紫色至紫色。
【貯存條件】 4℃,避光,密閉,12 個月
【注意事項】
1、蘇木素淡染非常重要,目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍(lán)的顏色。
2、研究表明,阿利新藍(lán)-PAS 聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響zui終結(jié)果。 PAS 技術(shù)在阿利新 藍(lán)染色之前時,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿利新藍(lán)染色在 PAS 技術(shù)之前時, 則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紅紫色。PAS 染色后,中性碳水化合物獲得親阿利新藍(lán)能力的原 因不明。然而,有人認(rèn)為,過碘酸氧化后形成的醛基可能與 Schiff 試劑中的亞硫酸鹽反應(yīng) 形成一個陰離子,再與隨后的阿利新藍(lán)結(jié)合。
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